[发明专利]淋巴细胞基因重排克隆性检测试剂盒及其检测方法

权利要求书

1.一种用于检测淋巴细胞基因重排克隆性的试剂盒，所述的试剂盒包含容器及容器内所含以下引物组合体：

组合体1：SEQ ID NO：1所示的正向引物+SEQ ID NO：2所示的反向引物；

组合体2：SEQ ID NO：3所示的正向引物+SEQ ID NO：4所示的反向引物；

组合体3：SEQ ID NO：5所示的正向引物+SEQ ID NO：6所示的反向引物；

组合体4：SEQ ID NO：7所示的正向引物+SEQ ID NO：8所示的反向引物；

组合体5：SEQ ID NO：9所示的正向引物+SEQ ID NO：10所示的反向引物；

组合体6：SEQ ID NO：11所示的正向引物+SEQ ID NO：12所示的反向引物；

组合体7：SEQ ID NO：13所示的正向引物+SEQ ID NO：14所示的反向引物；

组合体8：SEQ ID NO：15所示的正向引物+SEQ ID NO：16所示的反向引物；

组合体9：SEQ ID NO：17所示的正向引物+SEQ ID NO：18所示的反向引物；

组合体10：SEQ ID NO：19所示的正向引物+SEQ ID NO：20所示的反向引物；

组合体11：SEQ ID NO：21所示的正向引物+SEQ ID NO：22所示的反向引物；

组合体12：SEQ ID NO：23所示的正向引物+SEQ ID NO：24所示的反向引物；

组合体13：SEQ ID NO：25所示的正向引物+SEQ ID NO：.26所示的反向引物；

组合体14：SEQ ID NO：27所示的正向引物+SEQ ID NO：28所示的反向引物。

2.根据权利要求1所述的一种用于检测淋巴细胞基因重排克隆性的试剂盒，其特征在于，组合体中两种引物的比例为1∶3-3∶1，浓度为10pmol/ul。

3.一种如权利要求1所述的用于检测淋巴细胞基因重排克隆性的试剂盒的检测方法，包括以下步骤：

A、以待测淋巴组织活检或手术标本基因组DNA为模板，使用组合体1至14中任一或两者以上的组合的引物分别进行PCR反应；

B、检测对应于各组合体1至14的PCR反应产物的凝胶电泳条带判断基因重排的克隆性：

组合体1的PCR反应产物大小范围310-360bp；

组合体2的PCR反应产物大小范围250-290bp；

组合体3的PCR反应产物大小范围100-170bp；

组合体4的PCR反应产物大小范围110-290bp；390-420bp；

组合体5的PCR反应产物大小范围100-130bp；

组合体6的PCR反应产物大小范围120-160bp；190-210bp；260-300bp；

组合体7的PCR反应产物大小范围210-250bp；270-300bp；350-390bp；

组合体8的PCR反应产物大小范围140-165bp；

组合体9的PCR反应产物大小范围145-255bp；

组合体10的PCR反应产物大小范围80-220bp；

组合体11的PCR反应产物大小范围245-285bp；

组合体12的PCR反应产物大小范围245-285bp；

组合体13的PCR反应产物大小范围170-210bp；285-325bp；

组合体14的PCR反应产物大小范围120-280bp；

当PCR反应产物的凝胶电泳条带为对应于目的片段的单一条带，带宽在1mm左右，亮度强，边缘清晰整齐，则判断该组织淋巴细胞基因重排为单克隆性；

当PCR反应产物的凝胶电泳条带为在非目的片段位置出现条带，或带宽大于1mm，亮度弱，也可强，边缘模糊不整齐，均判断为非特异性杂带，则该组织淋巴细胞基因重排为多克隆性；

当PCR反应产物的凝胶电泳条带为涂抹状，或无明显条带出现则该组织淋巴细胞基因重排为多克隆性；

当PCR反应产物的凝胶电泳无引物二聚体出现，也无明显内对照基因目的片段条带出现，则为PCR反应失败。