[发明专利]一种大蒜试管苗高效生根培养基

说明书

技术领域

本发明涉及大蒜组织培养技术领域。尤其涉及一种大蒜试管苗高效生根培养基。

背景技术

目前，应用组织培养技术进行大蒜脱毒快繁已有大量研究，试管苗生根培养是组培过程中一个非常关键的环节，试管苗经过快繁培养后，由于移栽的需要，只有生产出强壮的根系，才能有利于培育壮苗，它直接影响到组培苗移栽成活率的高低，关系到组织培养的成败。目前，大蒜试管苗的生根率不高是制约大蒜脱毒种苗繁育进程的主要因素。1996年，王秀芝等研究了激素浓度对大蒜试管苗生根的影响，其中以NAA0.5mg/L、IBA0.5mg/L的MS大量元素减半培养基，对大蒜芽生根较合适，生根率为74％。2005年，于德才等在大蒜茎尖脱毒及快繁研究中，大蒜试管苗的最高生根率为73％；胡小京等(2011)进行了大蒜组织培养快繁技术的研究，他们对不同浓度NAA对大蒜不定芽苗生根的影响进行了探讨，研究结果表明，附加0.2～0.8mg/L NAA的MS培养基对大蒜不定苗的生根有不同程度的促进作用，其中添加0.4mg/L NAA的MS培养基上的不定苗的生根效果最好，生根率达到83.3％。影响不定根形成的因素很多，但主要是由培养基中的生长素、无机盐浓度决定的。但目前，有关大蒜组培中定向生根培养基的研究尚未见报道。为此，我们对大蒜试管苗生根培养基进行了研究，以期获得适合大蒜组织培养中试管苗生根的最佳培养基配方，提高大蒜试管苗的生根率，为试管苗移栽成活率奠定基础，并为建立大蒜组培脱毒快繁体系提供技术保障。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有制约大蒜种苗繁育的主要因素大蒜试管苗生根率低的问题，提供了一种大蒜试管苗高效生根培养基，具体技术方案如下：

本发明的一种大蒜试管苗高效生根培养基，每升培养基中的浓度按重量由1/2MS、NAA0.5mg、IAA0.1mg、蔗糖60000mg和余量为蒸馏水组成，pH值为5.8～6.0；

所述的1/2MS的成分是由硝酸钾950mg、硝酸铵825mg、硫酸镁185mg、氯化钙220mg、磷酸二氢钾85mg、肌醇50mg、硼酸3.1mg、硫酸锰11.2mg、碘化钾0.42mg、硫酸锌4.3mg、钼酸钠0.125mg、甘氨酸1.0mg、硫酸铜0.012mg、氯化钴0.012mg、盐酸硫胺素0.4mg、盐酸吡哆素0.5mg、烟酸0.5mg、硫酸亚铁27.8mg、乙二胺四乙酸二钠37.3mg和琼脂粉6500mg组成。

本发明的一种大蒜试管苗高效生根培养基是在大量实验的基础上从调整植物激素、蔗糖浓度入手，筛选出的大蒜试管苗高效生根培养基，该培养基大幅度地提高了试管苗的生根率及根的质量，不定根发生数多，根粗壮，平均根长为1.6cm，试管苗的生根率为95％，移栽成活率为98.6％；并且该培养基对试管微鳞茎的形成有一定的促进作用，为组培苗移栽高成活率打下基础，并为大蒜脱毒种蒜工厂化生产提供技术保障。

具体实施方式

具体实施方式一、本实施方式每升培养基中的浓度按重量由1/2MS、NAA0.5mg、IAA0.1mg、蔗糖60000mg和余量为蒸馏水组成，pH值为5.8～6.0；

所述的1/2MS的成分是由硝酸钾950mg、硝酸铵825mg、硫酸镁185mg、氯化钙220mg、磷酸二氢钾85mg、肌醇50mg、硼酸3.1mg、硫酸锰11.2mg、碘化钾0.42mg、硫酸锌4.3mg、钼酸钠0.125mg、甘氨酸1.0mg、硫酸铜0.012mg、氯化钴0.012mg、盐酸硫胺素0.4mg、盐酸吡哆素0.5mg、烟酸0.5mg、硫酸亚铁27.8mg、乙二胺四乙酸二钠37.3mg和琼脂粉6500mg组成。

具体实施方式二、本实施方式采用下列试验材料和方法：选取4～6cm高的试管苗，在超净台上将苗基部的愈伤组织去除，转入到生根培养基中，放在25～28℃，光照强度为2000LX，光照时间为12h/d，20天后统计生根率、根长、试管鳞茎的诱导率。当根长达2～3cm时，打开瓶膜炼苗3～5天，然后将根部的培养基洗净，进行移栽，15天后统计移栽成活率。

本发明的生根培养基：以1/2MS培养基成分为基础，pH值为5.8～6.0，调整植物激素IAA0.1～0.5mg/L、NAA0.1～0.5mg/L、蔗糖30000～90000mg/L的添加浓度，共设G₁～G₁₅组进行实验，实验结果如表1所示：

表1：不同的激素组成对试管苗的生根率及移栽成活率的影响

实验结果表明，不同生长素、蔗糖浓度对根的诱导率和生根株数有较大影响，其中以0.1mg/LIAA、0.5mg/LNAA和60000mg/L蔗糖组合的效果最佳。该组培养基中培养的大蒜试管苗植株健壮、不定根发生数量较多、并对试管鳞茎的形成有一定的促进作用，有利于试管苗移栽成活。试管苗的生根率达95％，移栽成活率为98.6％，试管微鳞茎的诱导率为15％，均高于其它组。