[发明专利]一种海南霉素的发酵方法

权利要求书

1.一种海南霉素的发酵方法，其特征是：以稠李东方链霉菌（Streptomyces padanus var. dangfangeusls）SDSL-HN1109 CGMCC NO.5308为菌种进行发酵制备，包括以下步骤：

（1）将冷藏的稠李东方链霉菌（Streptomyces padanus var. dangfangeusls）SDSL-HN1109 CGMCC NO.5308沙土孢子接种到斜面培养基上，在28℃下培养7天；

（2）用无菌水洗下步骤（1）斜面培养所得的孢子，加入甘油配成孢子悬浮液，在-70℃～-80℃下保存备用；

（3）将孢子悬浮液0.2ml接种到45-60ml种子培养基中，在28℃培养40～42小时，得种子液；

（4）将种子液按照10～20%的接种量接种到发酵培养基中，在28℃培养90～144小时，得发酵液。

2.根据权利要求1所述的发酵方法，其特征是稠李东方链霉菌（Streptomyces padanus var. dangfangeusls）沙土孢子的制备方法是：将菌种进行斜面培养，用接种针将所得孢子刮下，送入灭菌的沙土管中，搅动沙土，使粘附在接种针上的孢子与沙土充分混合，塞紧棉塞，敲松沙土，将沙土管放入真空干燥器内，常温下保持真空度0.08～0.1Mpa连续抽干40～60分钟，然后敲松沙土，将沙土管放入盛有变色硅胶的干燥器中，置于0～8℃冰箱中保藏备用。

3.根据权利要求1所述的发酵方法，其特征是，斜面培养基组分包括：玉米淀粉1.0wt%，酵母粉1.0wt%，碳酸钙0.8wt%，氯化钠0.3wt%，黄豆饼粉0.5wt%，葡萄糖1.0wt%，蛋白胨0.1wt%，硫酸镁0.05wt%，磷酸氢二钾0.02wt%，琼脂2.0wt%，饮用水余量。

4.  根据权利要求3所述的发酵方法，其特征是斜面培养基在配制时，玉米淀粉在70～80℃糊化10分钟再与其他成分混合。

5.根据权利要求1所述的发酵方法，其特征是，种子培养基组分包括：玉米淀粉1.0wt%，酵母粉1.0wt%，碳酸钙0.8wt%，氯化钠0.3wt%，黄豆饼粉0.5wt%，葡萄糖1.0wt%，蛋白胨0.1wt%，硫酸镁0.05wt%，磷酸氢二钾0.02wt%，饮用水余量，pH7.4～7.9。

6.根据权利要求1所述的发酵方法，其特征是，发酵培养基组分包括：豆油6～10wt%，黄豆饼粉2.0～3.0wt%，葡萄糖2.0wt%，碳酸钙0.5wt%，酵母粉0.5wt%，硫酸镁0.08wt%，磷酸氢二钾0.02wt%，氯化钠0.2 wt%，饮用水余量，pH7.4～7.9。

7.根据权利要求1所述的发酵方法，其特征是：制得的孢子悬浮液中，每毫升孢子悬浮液含有1×10⁸～1×10¹⁰个孢子。

8.根据权利要求1所述的发酵方法，其特征是：步骤（2）中，甘油的浓度为20wt%，甘油与无菌水的体积比为1:1。

9.根据权利要求1所述的发酵方法，其特征是：步骤（3）中，孢子悬浮液0.2ml接种到50ml种子培养基中。