[发明专利]一种利用复合蛋白酶制备活性胶原蛋白的方法无效
申请号: | 201210062288.6 | 申请日: | 2012-03-12 |
公开(公告)号: | CN103305575A | 公开(公告)日: | 2013-09-18 |
发明(设计)人: | 黄荣醒;郁帅陆;林琳 | 申请(专利权)人: | 江苏奥普莱医疗用品有限公司 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 徐激波 |
地址: | 225600 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 复合 蛋白酶 制备 活性 胶原 蛋白 方法 | ||
1.一种利用复合蛋白酶制备活性胶原蛋白的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)向已经过预处理的鱼皮中加入复合蛋白酶进行酶解;
(2)酶解完成后,抑制复合蛋白酶;
(3)将酶解液进行离心,取上清液;
(4)将上清液超滤浓缩再进行盐析;
(5)再超滤脱盐并浓缩,即得。
2.根据权利要求1所述的一种利用复合蛋白酶制备活性胶原蛋白的方法,其特征在于:步骤(1)中所述鱼皮混合液浓度为2.0-8.0wt%,调节pH至2-6;所述的复合蛋白酶由木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶、动物蛋白水解酶、酸性蛋白酶和胃蛋白酶中的任意两种或两种以上所组成;所述的酶解按照以下条件进行:复合蛋白酶的用量为鱼皮混合液重量2.0-8.0wt%,酶解温度是4-16℃,酶解时间6-10h,酶解反应体系的pH值控制在5.0-9.0。
3.根据权利要求1所述的一种利用复合蛋白酶制备活性胶原蛋白的方法,其特征在于:步骤(2)中所述的灭活复合蛋白酶的方法如下:向胶原蛋白酶解反应体系中加入抑制剂。
4.根据权利要求1所述的一种利用复合蛋白酶制备活性胶原蛋白的方法,其特征在于:步骤(3)中将酶解液按照以下方法离心,得到澄清透明的上清液:离心转速为4000-5000r/min。
5.根据权利要求1所述的一种利用复合蛋白酶制备活性胶原蛋白的方法,其特征在于:步骤(4)中所述的超滤浓缩按照以下条件进行:操作压力0.15-0.35MPa,温度4-10℃,pH 2-6,超滤膜孔径为10-50nm;所述的盐析按照以下条件进行:胶原蛋白溶液浓度为2.5-5.5%,NaCl浓度为10-30%,pH值为2-6,温度为4-10℃。
6.根据权利要求1所述的一种利用复合蛋白酶制备活性胶原蛋白的方法,其特征在于:步骤(5)中所述的超滤按照以下条件进行:操作压力0.5-1.0Mpa,温度为4-10℃,pH2-6,超滤膜孔径为100-200nm。
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