[发明专利]灰毡毛忍冬渝蕾1号种苗的组织培养基

说明书

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，涉及一种植物种苗的组织培养基。

背景技术

灰毡毛忍冬（Lonicera m acranthoides Hand. Mazz）是忍冬科忍冬属多年生半常绿缠绕小灌木或直立小灌木植物，其花蕾的绿原酸含量在全国各种金银花中最高，是西南、中南地区商品金银花的主要品种之一。

渝蕾1号于2008年经重庆市林木品种审定委员会审定为灰毡毛忍冬的一个新品种。该品种亩产鲜花达400千克以上，较传统种植灰毡毛忍冬增产30~80%，抗逆性和适应性也较传统家种灰毡毛忍冬强，其最显著的特点是花期长达20~30天且整个花期都是花蕾，基本上不开花，与传统家种灰毡毛忍冬7~10天的花蕾期相比，采摘期大大延长，便于采摘用工安排和加工时间安排。该品种已列入重庆“两翼”农户万元增收计划中。由于该品种植株性状变异较大，目前通常采用无性系育种方法如扦插、嫁接繁殖优良单株无性系，但嫁接的砧木和接穗资源不多，扦插成活率低于40%，导致繁殖系数较低，不能满足生产和市场需求。因此，通过组织培养的无性繁殖在短期内实现种苗产业化很有市场前景。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种适用于灰毡毛忍冬渝蕾1号种苗繁育的组织培养基，具有愈伤组织诱导率高，不定芽分化率和增殖系数高，生根率高，试管苗移栽成活率高，芽苗生长健壮、叶形叶色正常、皮下生根、新叶萌发快等优点，能够满足灰毡毛忍冬渝蕾1号大面积规模化栽培的需要。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

灰毡毛忍冬渝蕾1号种苗的组织培养基，包括下述培养基中的至少一种：

A．愈伤组织诱导培养基：以B5为基本培养基，并添加6-苄氨基嘌呤（6-BA）2mg/L、激动素（KT）2mg/L、萘乙酸（NAA）0.1mg/L、卡拉胶5.5~6.0g/L和蔗糖30g/L，调节pH至5.6~5.8；

B．不定芽分化培养基：以B5为基本培养基，并添加6-BA 1mg/L、KT 2mg/L、NAA 0.1mg/L、卡拉胶5.5~6.0g/L和蔗糖30g/L，调节pH至5.6~5.8；

C．不定芽继代培养基：以MB为基本培养基，并添加6-BA 1mg/L、吲哚乙酸（IAA）0.8mg/L、卡拉胶5.5~6.0g/L和蔗糖30g/L，调节pH至5.6~5.8；

D．生根培养基：以1/3MB培养基为基本培养基，并添加吲哚丁酸（IBA）1.5mg/L、IAA 0.1mg/L、卡拉胶5.5~6.0g/L和蔗糖20g/L，调节pH至5.6~5.8。

进一步，所述灰毡毛忍冬渝蕾1号种苗的组织培养基包括下述四种培养基：

A．愈伤组织诱导培养基：以B5为基本培养基，并添加6-BA 2mg/L、KT 2mg/L、NAA 0.1mg/L、卡拉胶6.0g/L和蔗糖30g/L，调节pH至5.8；

B．不定芽分化培养基：以B5为基本培养基，并添加6-BA 1mg/L、KT 2mg/L、NAA 0.1mg/L、卡拉胶6.0g/L和蔗糖30g/L，调节pH至5.8；

C．不定芽继代培养基：以MB为基本培养基，并添加6-BA 1mg/L、IAA 0.8mg/L、卡拉胶6.0g/L和蔗糖30g/L，调节pH至5.8；

D．生根培养基：以1/3MB培养基为基本培养基，并添加IBA 1.5mg/L、IAA 0.1mg/L、卡拉胶5.5g/L和蔗糖20g/L，调节pH至5.8。 

上述技术方案中涉及的B5培养基是1968年Gamborg等设计的培养基，为植物组织培养中的常用培养基；MS培养基是1962年Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的培养基，也是植物组织培养中的常用培养基；MB培养基是发明人在MS培养基的基础上改良而得，主要是对MS培养基中大量元素的种类及其浓度进行了调整，微量元素的种类与MS培养基相同但各组分的浓度约相当于MS培养基中浓度的2/3，铁盐与有机物的种类及其浓度与MS培养基相同；1/2、1/3、1/4MB培养基是指培养基中大量元素各组分的浓度分别相当于MB培养基中浓度的1/2、1/3、1/4，微量元素、铁盐与有机物的浓度与MB培养基相同。B5、MS和MB培养基的具体配方如下表所示。