[发明专利]一种两阶段pH控制高产a-酮戊二酸的方法有效
| 申请号： | 201210056106.4 | 申请日： | 2012-03-06 |
| 公开（公告）号： | CN102586347A | 公开（公告）日： | 2012-07-18 |
| 发明（设计）人： | 陈坚;周景文;余宗钟;堵国成 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12P7/50 | 分类号： | C12P7/50;C12R1/645 |
| 代理公司： | 北京汇信合知识产权代理有限公司 11335 | 代理人： | 王秀丽 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 阶段 ph 控制 高产 酮戊二酸 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种两阶段pH控制高产α-酮戊二酸的方法，其特征在于以解脂亚洛酵母(Yarrowia lipolytica)CCTCC NO.M207143为生产菌株，发酵前期以CaCO3为pH缓冲剂，后期用NaOH维持pH在2.5。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于具体步骤为以解脂亚洛酵母为出发菌株，接种到产孢子培养基，28℃培养10天至分生孢子成熟；生理盐水洗下分生孢子，以4％的体积比转接至前培养培养基，28℃，400rpm培养40h；以10％的体积比转接至发酵培养基，28℃，400rpm，通气量1.5vvm，添加20g/L CaCO3为发酵液pH缓冲剂培养至发酵液pH下降至2.5，再以4mol/LNaOH溶液维持发酵液pH在2.5培养至168h。
3.根据权利要求书2所述的方法，其特征是产孢子培养基成分(g/L)：葡萄糖1，氯化钾1.8，酵母汁2.5，醋酸钠8.2，琼脂15，pH自然。
4.根据权利要求书2所述的方法，其特征是前培养培养基成分(g/L)：葡萄糖20，蛋白胨10，磷酸二氢钾1，七水硫酸镁0.5。
5.根据权利要求书2-4任一所述的方法，其特征是发酵培养基成分(g/L)：甘油100，硫酸铵3，磷酸二氢钾3，七水硫酸镁1.2，氯化钠0.5，磷酸氢二钾0.1，盐酸硫胺0.2×10-6。
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