[发明专利]产生褐藻胶裂解酶的菌株及其发酵方法有效

专利信息
申请号: 201210053384.4 申请日: 2012-03-03
公开(公告)号: CN102586150A 公开(公告)日: 2012-07-18
发明(设计)人: 张心齐;柏超;迟方涛;郑刚;吴敏 申请(专利权)人: 浙江大学舟山海洋研究中心
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12N9/88;C12R1/01
代理公司: 杭州求是专利事务所有限公司 33200 代理人: 张法高;赵杭丽
地址: 316021 浙江省舟山*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 产生 褐藻 裂解 菌株 及其 发酵 方法
【权利要求书】:

1.一株产生褐藻胶裂解酶的菌株,分类命名为Tamlana sp.,保藏号为CGMCC No. 5324,保藏日2011年10月14日,菌株名称:ZJU HZ22。

2.一种根据权利要求1所述菌株发酵制备褐藻胶裂解酶的方法,通过以下步骤实现:

(1)将菌株的斜面培养物接种至种子培养基中,于28-32℃、120 rpm条件下培养14-16小时至对数生长期,得种子液;

(2)生长良好的种子液以0.2%的接种量转接发酵培养基,相同条件下培养48小时,得发酵液;

(3)发酵液经高速离心获取上清液,此即褐藻胶裂解酶酶液;

步骤(1)所述种子培养基为marine broth 2216,配方如下:蛋白胨5 g, 酵母抽提物1 g, 柠檬酸铁0.1 g, 氯化钠19.45 g, 六水合氯化镁12.6 g, 七水合硫酸镁6.64 g, 氯化钙1.8 g, 氯化钾0.55 g, 碳酸氢钠0.16 g, 溴化钾0.08 g, 六水合氯化锶57.00 mg, 硼酸22.00 mg, 九水合硅酸钠9.30 mg, 氟化钠2.40 mg, 硝酸铵2.40 mg, 磷酸氢二钠8.00 mg,pH 7.0-7.5;

步骤(2)所述发酵培养基为含0.4%海藻酸钠的2216培养基,其中,海藻酸钠作为提高褐藻胶裂解酶分泌量的刺激底物,发酵体系按200 ml培养基/500 ml摇瓶比例设置,于28℃,120 rpm条件下培养。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤(3)所述发酵液于12000 g × 10 min离心去除菌体。

4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤(1)所述种子培养基直接选用生物公司外售的marine broth 2216,或者由生物公司外售的sea salt代替上述无机盐成分配制。

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