[发明专利]用于制备神经干细胞的培养基及其用途

权利要求书

1.一种用于制备神经干细胞的培养基，其特征在于，包含：

基础培养基，所述基础培养基适于干细胞生成；以及

细胞信号通路抑制剂，所述细胞信号通路抑制剂为选自GSK抑制剂、MEK抑制剂、TGF-β抑制剂、ROCK抑制剂和BMP抑制剂的至少一种。

2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述基础培养基为mTeSR1。

3.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述细胞信号通路抑制剂为GSK抑制剂CHIR99021、MEK抑制剂PD0325901、TGF-β抑制剂A83-01、ROCK抑制剂thiazovivin和BMP抑制剂DMH1的组合。

4.根据权利要求3所述的培养基，其特征在于，按照重量百分比，所述培养基含有：

浓度为0.3μM-30μM的GSK抑制剂CHIR99021；

浓度为10nM-10μM的MEK抑制剂PD0325901；

浓度为50nm-5μM的TGF-β抑制剂A83-01；

浓度为50nm-5μM的ROCK抑制剂thiazovivin；以及

浓度为20nm-2μM的BMP抑制剂DMH1。

5.根据权利要求3所述的培养基，其特征在于，按照重量百分比，所述培养基含有：

浓度为3μM的GSK抑制剂CHIR99021；

浓度为1μM的MEK抑制剂PD0325901；

浓度为0.5μM的TGF-β抑制剂A83-01；

浓度为0.5μM的ROCK抑制剂thiazovivin；以及

浓度为0.2μM的BMP抑制剂DMH1。

6.一种用于制备神经干细胞的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中含有细胞信号通路抑制剂，所述细胞信号通路抑制剂为选自GSK抑制剂、MEK抑制剂、TGF-β抑制剂、ROCK抑制剂和BMP抑制剂的至少一种。

7.根据权利要求6所述的制备神经干细胞的试剂盒，其特征在于，所述细胞信号通路抑制剂为GSK抑制剂CHIR99021、MEK抑制剂PD0325901、TGF-β抑制剂A83-01、ROCK抑制剂thiazovivin和BMP抑制剂DMH1的组合。

8.根据权利要求7所述的制备神经干细胞的试剂盒，其特征在于，所述GSK抑制剂CHIR99021、MEK抑制剂PD0325901、TGF-β抑制剂A83-01、ROCK抑制剂thiazovivin和BMP抑制剂DMH1分别设置在不同的容器中。

9.根据权利要求6所述的制备神经干细胞的试剂盒，其特征在于，进一步包括基础培养基，所述基础培养基为mTeSR1。

10.根据权利要求9所述的制备神经干细胞的试剂盒，其特征在于，所述细胞信号通路抑制剂溶解于所述基础培养基中。

11.根据权利要求10所述的制备神经干细胞的试剂盒，其特征在于，按照重量百分比，所述细胞信号通路抑制剂为：浓度为3μM的GSK抑制剂CHIR99021、浓度为1μM的MEK抑制剂PD0325901、浓度为0.5μM的TGF-β抑制剂A83-01、浓度为0.5μM的ROCK抑制剂thiazovivin以及浓度为0.2μM的BMP抑制剂DMH1的组合。

12.一种用于制备神经干细胞的试剂盒，其特征在于，包含权利要求1-5任一项所述的培养基。

13.权利要求6-12任一项所述的试剂盒在制备神经干细胞中的用途。

14.权利要求1-5任一项所述的培养基在制备神经干细胞中的用途。

15.一种制备神经干细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：

利用权利要求1-5任一项所述的培养基，培养体细胞，所述体细胞携带编码选自Oct4、Sox2、Klf4以及miR302的至少一种多功能干细胞因子的核酸序列，以便诱导所述体细胞转分化为神经干细胞。

16.根据权利要求15所述的方法，其特征在于，所述体细胞为人尿液脱落细胞。