[发明专利]一种λ-卡拉胶寡糖的制备方法有效
申请号: | 201210049090.4 | 申请日: | 2012-02-29 |
公开(公告)号: | CN103290079A | 公开(公告)日: | 2013-09-11 |
发明(设计)人: | 上官巧灵;陈海敏;严小军 | 申请(专利权)人: | 宁波大学 |
主分类号: | C12P19/14 | 分类号: | C12P19/14;C12R1/01 |
代理公司: | 宁波诚源专利事务所有限公司 33102 | 代理人: | 袁忠卫 |
地址: | 315211 *** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 卡拉 寡糖 制备 方法 | ||
1.一种λ-卡拉胶寡糖的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
1)配制ATCC medium 1575固体培养基和液体培养基,产λ-卡拉胶降解酶的菌株Pseudoalteromonas carrageenovora在温度20~25℃的固体斜面培养1~2d,然后接种至液体培养基在20~25℃培养1~2d,促使其胞外产生λ-卡拉胶降解酶;
2)按体积比1∶0.8~1.2比例将上述含酶的培养液加入到无菌λ-卡拉胶溶液中,使λ-卡拉胶的终浓度为0.5(wt)%-2.0(wt)%,再置于摇床或发酵罐中反应1~5d,反应温度为20~30℃,转速为100~150rpm;
3)将上述反应液在5000~10000rpm转速下离心10~30min或过滤,收集上清液或滤液;
4)将该上清液或滤液用1~2倍体积洗净的活性炭处理3~5h,吸附聚合度较小的寡糖,纯水洗脱未吸附的寡糖和盐类杂质,再利用20(v)%~40(v)%的乙醇对吸附后活性炭进行洗脱,洗脱液真空浓缩,冷冻干燥,得到λ-卡拉胶寡糖。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于所述λ-卡拉胶降解菌株Pseudoalteromonas carrageenovora来源于美国标准生物品收藏中心,收藏号:43555。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于所述步骤2)中的无菌λ-卡拉胶溶液中是在ATCC medium 1575液体培养基中加入λ-卡拉胶,使λ-卡拉胶的浓度为1.0(wt)%~4.0(wt)%。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于步骤4)中乙醇的洗脱体积为10-20倍原溶液体积。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于所述λ-卡拉胶寡糖的结构特征如下:
其中n=1-4,为自然数。
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