[发明专利]抗CD4蛋白的单克隆抗体及其活性片段及用途

权利要求书

1.一种单克隆抗体或其抗原结合部分，其具有至少一项选自以下的特征：

(i)特异性结合人表面抗原分化簇4蛋白；

(ii)与含有人表面抗原分化簇4蛋白D1结构域的截短形式的人表面抗原分化簇4多肽特异性反应；

(iii)对人免疫缺陷病毒包膜糖蛋白gp120与人表面抗原分化簇4蛋白的反应无明显影响；和

(iv)阻断人免疫缺陷病毒感染CD4⁺细胞及再感染，和/或阻断由此引起的疾病，例如艾滋病。

2.一种单克隆抗体或其抗原结合部分，其中所述抗体的重链的CDR1、CDR2和CDR3和所述抗体的轻链的CDR1、CDR2和CDR3分别是CCTCC保藏号C201098的杂交瘤产生的抗体15A7或抗体14G7的重链CDR1、CDR2和CDR3和轻链CDR1、CDR2和CDR3。

3.一种单克隆抗体或其抗原结合部分，其中所述抗体的重链可变区和轻链可变区分别是CCTCC保藏号C201098的杂交瘤产生的抗体15A7或抗体14G7的重链可变区和轻链可变区。

4.权利要求1-3任一项蛋白的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中所述抗体的重链可变区的氨基酸序列和轻链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：4所示；或者所述抗体的重链可变区的氨基酸序列和轻链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID NO：18和SEQID NO：20所示。

5.如权利要求1-4任一项所述的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中所述抗体的重链CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别为SEQID NOs：5-7或由SEQ ID NOs：11-13的核苷酸序列编码，所述抗体的轻链CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别为SEQ ID NOs：8-10或由SEQ ID NOs：14-16的核苷酸序列编码；或者，所述抗体的重链CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别为SEQ ID NOs：21-23或由SEQ IDNOs：27-29的核苷酸序列编码，所述抗体的轻链CDR1、CDR2和CDR3的氨基酸序列分别为SEQ ID NOs：24-26或由SEQ ID NOs：30-32的核苷酸序列编码。

6.如权利要求1-5任一项所述的单克隆抗体或其抗原结合部分，其为Fab、Fab′、F(ab′)₂、Fv或单链抗体。

7.如权利要求1-5任一项所述的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中，所述的单克隆抗体结合人表面抗原分化簇4蛋白的K_D值小于1×10^-5M。

8.如权利要求1-7任一项所述的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中，所述的单克隆抗体包括非CDR区，该非CDR区是来自非鼠类的物种。

9.一种特异性结合人表面抗原分化簇4蛋白的单克隆抗体，其是CCTCC保藏号C201098的杂交瘤产生的抗体15A7。

10.一种杂交瘤细胞株，其是CCTCC保藏号C201098的杂交瘤。

11.一种检测样品中人表面抗原分化簇4蛋白的方法，其包括如下步骤：

a)将所述的样品与权利要求1-9任一项的单克隆抗体或其抗原结合部分接触；

b)检测所述的单克隆抗体与所述样品中的蛋白的反应；

c)检测所述的单克隆抗体与所述样品中的蛋白及人免疫缺陷病毒包膜蛋白的反应；

优选地，其中所述的单克隆抗体或其抗原结合部分附着在固相载体上；优选地，其中所述的固相载体选自：微滴定板、磁颗粒、胶乳颗粒和硝化纤维素膜；更优选地，其中所述的单克隆抗体或其抗原结合部分是按如此方向附着在所述固相上，该方向能够增加所述单克隆抗体与所述样品的结合效率；更优选地，其中所述的单克隆抗体或其抗原结合部分是通过其恒定区域而附着在所述固相上的。

12.一种治疗受试者中由人免疫缺陷病毒感染引发的疾病的方法，其包括向所述的受试者施用治疗上有效量的、权利要求1-9任一项所述的单克隆抗体或其抗原结合片段。

13.权利要求1-9任一项所述的单克隆抗体用于制备治疗或预防以CD4+细胞为目标细胞的疾病(如艾滋病)的药物的用途，用于制备阻断HIV感染CD4+细胞及再感染的药物的用途。

14.一种药物组合物，其包含如权利要求1-9任一项所述的单克隆抗体或其抗原结合部分以及药学上可接受的载体；优选地，其中所述的单克隆抗体或其抗原结合部分为Fab、Fab′、F(ab′)₂或Fv。