[发明专利]一种新型抗肿瘤amiRNA序列及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种新型抗肿瘤amiRNA序列及其应用。

背景技术

端粒是存在于真核细胞线状染色体末端的一小段重复的DNA序列5’-GGTTAG-3’，它与端粒结合蛋白一起构成了特殊的“帽子”结构，维持着染色体和基因组的完整性与稳定性(Rlackburn，E.H.Nature，350，569-573；1991.)。在正常体细胞中，细胞每分裂一次，由于DNA复制时的“冈崎片段”效应，端粒就缩短一点。一旦端粒消耗殆尽，染色体则易于突变而导致凋亡或其它癌变。因此，端粒和细胞老化有明显的关系。其长度反映着细胞复制史及复制潜能，被称作细胞寿命的“有丝分裂钟”(Kim Sh，S.H.，et al.Oncogene 21，503-511；2002.)。当端粒缩短到一定程度时，某些细胞为了逃避短端粒带来的凋亡效应，只有突变产生相应的“端粒维持机制”。通过“端粒维持机制”，这些细胞进行疯狂的增殖和复制，慢慢走向癌化的道路。目前已经报道的“端粒维持机制”除少数是‘非端粒酶依赖型’的外，绝大部分都是‘端粒酶依赖型’的，简单的说就是通过表达端粒酶来实现端粒的延伸或维持((Shay and Roninson，2004)。

端粒酶(Telomerase)，在细胞中负责端粒的延长的一种酶，是基本的核蛋白逆转录酶，可将端粒DNA加至真核细胞染色体末端。简单来说，端粒酶是RNA和蛋白质的复合体，如人的端粒酶分别由起模板作用的端粒酶RNA(hTR)、起组装作用的端粒酶结合蛋白(hTP1)和起催化作用的端粒酶逆转录酶(hTERT)组成(Olovnikov，1971)。越来越多的研究表明，在哺乳动物中，各细胞中hTR的表达是普遍的，特异性不强；而hTERT则呈现与端粒酶活性极强的正相关性，是端粒酶活性的限速成份(Meyerson et al.，1997)。

实验表明，约85％-90％的肿瘤细胞中呈现端粒酶活性显著升高，而正常的成体细胞则显示低活性，因而端粒酶作为肿瘤治疗的最理想靶点早已是一个不争的事实(Hahn et al.，1999)。近年来通过调节端粒酶活性来干预肿瘤的研究日益增多，同时也取得了很好的效果，但主要局限在寡核苷酸和疫苗的临床研究方面(Brunsvig et al.，2006；Gandellini et al.，2007)。杰隆(Geron)的GRN163L是此类药物开发中最前沿的一个候选药物，早在2005年，FDA同意GRN163L在患慢性淋巴细胞白血病患者的临床实验。2007年，Geron公司开始GRN163L单独治疗多发性骨髓瘤的I期临床试验。2008年开始了GRN163L治疗乳腺癌的I期临床实验。同年12月，Geron发布了有关GRN163L治疗再发的和难治的多发性骨髓瘤的暂时性临床试验数据。2009年，Greron又发布了Geron163L对肿瘤干细胞的实验进展，包括非小型细胞肺癌、乳癌、胰脏炎、前列腺癌、小儿科神经肿瘤。数据显示，在以Geron163L治疗后，人类乳癌细胞MCF7的假定干细胞数量与自我再生的能力大幅减弱。目前Geron163L正处于临床II期试验中同样令人振奋的是KAEL-GemVax公司的抗端粒酶疫苗GV1001业已进入临床III期。