[发明专利]来自丙酸梭菌的丙酰辅酶A转移酶的突变体和使用该突变体制备PLA或PLA共聚物的方法

权利要求书

1.一种编码提供乳酰辅酶A的丙酰辅酶A转移酶的基因，该基因具有其中突变为A1200G的SEQ ID NO：3的基因序列。

2.一种编码提供乳酰辅酶A的丙酰辅酶A转移酶的基因，该基因具有其中突变为A1200G的SEQ ID NO：3的基因序列和其中突变为Gly335Asp的对应于SEQ ID NO：3的氨基酸序列。

3.一种编码提供乳酰辅酶A的丙酰辅酶A转移酶的基因，该基因具有其中突变为A1200G的SEQ ID NO：3的基因序列和其中突变为Ala243Thr的对应于SEQ ID NO：3的氨基酸序列。

4.一种编码提供乳酰辅酶A的丙酰辅酶A转移酶的基因，该基因具有其中突变为A1200G的SEQ ID NO：3的基因序列和其中突变为Asp257Asn的对应于SEQ ID NO：3的氨基酸序列。

5.一种用于合成聚乳酸酯或聚乳酸酯共聚物的重组载体，其包含根据权利要求1～4中任一项所述的基因。

6.根据权利要求5所述的重组载体，其进一步包含SEQ ID NO：4的聚羟基链烷酸酯合酶基因(phaCl_Ps6-19300)，该酶能够使用乳酰辅酶A作为底物合成聚乳酸酯或聚乳酸酯共聚物。

7.一种用根据权利要求5所述的重组载体转化的细菌。

8.一种用根据权利要求6所述的重组载体转化的细菌。

9.一种制备聚乳酸酯或聚乳酸酯共聚物的方法，该方法包括培养根据权利要求7所述的细菌或者使根据权利要求7所述的细菌生长。

10.一种制备聚乳酸酯或聚乳酸酯共聚物的方法，该方法包括培养根据权利要求8所述的细菌或者使根据权利要求8所述的细菌生长。

11.根据权利要求9所述的方法，其中，在包含羟基链烷酸酯的环境中进行所述培养或生长。

12.根据权利要求11所述的方法，其中，所述羟基链烷酸酯为选自3-羟丁酸酯、3-羟戊酸酯、4-羟丁酸酯、具有6～14个碳原子的中链长(D)-3-羟基羧酸、2-羟基丙酸、3-羟基丙酸、3-羟基己酸、3-羟基庚酸、3-羟基辛酸、3-羟基壬酸、3-羟基癸酸、3-羟基十一烷酸、3-羟基十二烷酸、3-羟基十四烷酸、3-羟基十六烷酸、4-羟基戊酸、4-羟基己酸、4-羟基庚酸、4-羟基辛酸、4-羟基癸酸、5-羟基戊酸、5-羟基己酸、6-羟基十二烷酸、3-羟基-4-戊烯酸、3-羟基-4-反式-己烯酸、3-羟基-4-顺式-己烯酸、3-羟基-5-己烯酸、3-羟基-6-反式-辛烯酸、3-羟基-6-顺式-辛烯酸、3-羟基-7-辛烯酸、3-羟基-8-壬烯酸、3-羟基-9-癸烯酸、3-羟基-5-顺式-十二烯酸、3-羟基-6-顺式-十二烯酸、3-羟基-5-顺式-十四烯酸、3-羟基-7-顺式-十四烯酸、3-羟基-5，8-顺式-顺式-十四烯酸、3-羟基-4-甲基戊酸、3-羟基-4-甲基己酸、3-羟基-5-甲基己酸、3-羟基-6-甲基庚酸、3-羟基-4-甲基辛酸、3-羟基-5-甲基辛酸、3-羟基-6-甲基辛酸、3-羟基-7-甲基辛酸、3-羟基-6-甲基壬酸、3-羟基-7-甲基壬酸、3-羟基-8-甲基壬酸、3-羟基-7-甲基癸酸、3-羟基-9-甲基癸酸、3-羟基-7-甲基-6-辛烯酸、苹果酸、3-羟基琥珀酸-甲酯、3-羟基己二酸-甲酯、3-羟基辛二酸-甲酯、3-羟基壬二酸-甲酯、3-羟基癸二酸-甲酯、3-羟基辛二酸-乙酯、3-羟基癸二酸-乙酯、3-羟基庚二酸-丙酯、3-羟基癸二酸-苄酯、3-羟基-8-乙酰氧基辛酸、3-羟基-9-乙酰氧基壬酸、苯氧基-3-羟基丁酸、苯氧基-3-羟基戊酸、苯氧基-3-羟基庚酸、苯氧基-3-羟基辛酸、对氰基苯氧基-3-羟基丁酸、对氰基苯氧基-3-羟基戊酸、对氰基苯氧基-3-羟基己酸、对硝基苯氧基-3-羟基己酸、3-羟基-5-苯基戊酸、3-羟基-5-环己基丁酸、3，12-二羟基十二烷酸、3，8-二羟基-5-顺式-十四烯酸、3-羟基-4，5-环氧癸酸、3-羟基-6，7-环氧十二烷酸、3-羟基-8，9-环氧-5，6-顺式-十四烷酸、7-氰基-3-羟基庚酸、9-氰基-3-羟基壬酸、3-羟基-7-氟庚酸、3-羟基-9-氟壬酸、3-羟基-6-氯己酸、3-羟基-8-氯辛酸、3-羟基-6-溴己酸、3-羟基-8-溴辛酸、3-羟基-11-溴十一烷酸、3-羟基-2-丁烯酸、6-羟基-3-十二烯酸、3-羟基-2-甲基丁酸、3-羟基-2-甲基戊酸和3-羟基-2，6-二甲基-5-庚烯酸中的至少一种。