[发明专利]检测沙丁胺醇的试剂盒或试纸条

说明书

技术领域

本发明涉及检测沙丁胺醇的试剂盒或试纸条。

背景技术

沙丁胺醇(Salbutamol)，是一种选择性β2-受体激动剂(β-兴奋剂)，医疗中用于治疗喘息型支气管炎、支气管哮喘、肺气肿所致的支气管痉挛。该药物不是兽药，也不是饲料添加剂。由于沙丁胺醇检测手段的相对滞后，但又与克伦特罗具有同样促生长效果，因而逐步取代克伦特罗成为新一代“瘦肉精”，用于非法谋取经济利益。沙丁胺醇作为营养重分配剂添加到饲料中，可以促进动物瘦肉生长、减少脂肪产生、提升单位经济价值，但同时也会造成药物蓄积、残留在动物机体中。沙丁胺醇一次性摄入量较多时对人体存在多种毒副作用，可导致体内聚集浓度升高而继发心脏肥大，并造成心脏跳动过速，严重时会出现心肌梗死，长期摄入过量沙丁胺醇，可能产生生殖内分泌毒性。世界卫生组织、美国、欧盟及一些发达国家等都先后立法禁止在畜禽生产中使用β-兴奋剂作为促动物生长饲料添加剂。我国在农业部第235号公告中明确规定了禁止使用沙丁胺醇，并不得在所有动物性食品中检出。

目前，国家标准和行业标准中对饲料及动物源性食品中沙丁胺醇残留的检测常采用液相色谱-质谱/质谱法。虽然此方法特异性强、灵敏度高，但是样品前处理操作步骤繁琐，成本较高，也不适用于大批量样品的筛选检测。免疫分析，由于在抗原抗体的定性定量方面独特的优势和操作简便快速、成本低、灵敏度较高、分析样本量大的优点弥补了理化分析的不足，在β-兴奋剂的残留检测中起着越来越重要的作用。快速检测试纸操作简便快速、成本低、灵敏度较高、分析样本量大的优点弥补了理化分析的不足，在动物组织、饲料、兽药的残留检测中起着越来越重要的作用。

发明内容

本发明的目的是提供检测沙丁胺醇试剂盒的或试纸条。

本发明提供的检测沙丁胺醇的酶联免疫试剂盒，包括抗沙丁胺醇单克隆抗体杂交瘤细胞2E9分泌的单克隆抗体。

抗沙丁胺醇单克隆抗体杂交瘤细胞2E9，简称杂交瘤细胞2E9，已于2012年2月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏号为CGMCC No.5791。

所述试剂盒可为如下1)至4)中的任意一种：

1)包括式(I)所示化合物与载体蛋白的偶联物、所述单克隆抗体和酶标记抗抗体的试剂盒；其中，所述偶联物作为包被原；

2)包括式(I)所示化合物的酶标记物、所述单克隆抗体和抗抗体的试剂盒；其中，所述抗抗体作为包被原；

3)包括式(I)所示化合物的酶标记物和所述单克隆抗体的试剂盒；其中，所述单克隆抗体作为包被原；

4)包括式(I)所示化合物与载体蛋白的偶联物和所述单克隆抗体的酶标记物的试剂盒；其中，所述偶联物作为包被原。

式(I)。

式(I)所示化合物与载体蛋白的偶联物具体如式(II)所示。

式(II)。

所述载体蛋白可为卵清蛋白(OVA)或牛血清白蛋白(BSA)。

所述偶联物中，式(I)所示化合物与载体蛋白的偶联比具体可为(8-11)∶1。所述偶联比指的是摩尔比。式(I)所示化合物与所述载体蛋白可以以碳氮键偶联。

所述试剂盒还包括洗涤液、样品浓缩液、底物显色液和终止液中的至少一种。

每1升洗涤液可按照如下方法配制得到：将10ml吐温20、5g叠氮化钠和990ml磷酸盐缓冲液混合，得到洗涤液。所述磷酸盐缓冲液可为pH7.2-7.6、0.005M-0.015M的磷酸盐缓冲液，具体可为的浓度可为pH7.4、0.01M)的磷酸钠缓冲液。

所述样品浓缩液可为浓度为0.03mol/L-0.05mol/L的磷酸盐缓冲液，优选为pH7.4、0.04mol/L的PBS缓冲液。

所述底物显色液包括显色液A和显色液B，可为独立包装的显色液A和显色液B，也可直接将显色液A和显色液B等体积混合得到。所述显色液可为过氧化氢溶液或过氧化脲溶液；所述显色液B可为邻苯二胺(OPD)溶液或四甲基联苯胺(TMB)溶液。所述显色液A具体可为2％(g/100ml)过氧化脲水溶液。所述显色液B具体可为1％(g/100ml)四甲基联苯胺水溶液。

所述终止液具体可为0.2M硫酸水溶液。

以上任一所述试剂盒均可用于检测沙丁胺醇。

以上任一所述试剂盒均可用于检测待测样本中是否含有沙丁胺醇。