[发明专利]检测喹噁啉类化合物的试剂盒或试纸条

说明书

技术领域

本发明涉及检测喹噁啉类化合物的试剂盒或试纸条。

背景技术

喹噁啉类化合物是一类分子中均有喹噁啉-1，4-二氧化物母核结构人工合成的抗菌药，主要成员有喹乙醇(olaquindox，OLA)、卡巴氧(cabadox，CBX)、乙酰甲喹(mequindox，MEQ)和喹烯酮(quinocetone，QCT)等。喹噁啉类化合物可以抑菌促生长，因此被广泛的用作饲料添加剂。随着研究的深入，发现喹噁啉类化合物有明显的毒副作用，长期不合理使用会导致动物体本身中毒，产生致癌、致畸、致突变性，同时会导致动物源性食品的药物残留。

目前国内外对喹噁啉类化合物的检测多采用仪器方法。高效液相色谱法(HPLC)灵敏度高，但须专人操作，不适合批量样品的筛选。迫切需要建立灵敏、快速、操作简单，适合大量样本筛查的方法。基于酶免疫的ELISA方法具有灵敏度高、易于使用、设备简单、快速等优点，免疫胶体金层析技术不需任何仪器设备和试剂，特别适合于基层单位大批量时间紧的检测和大面积普查，在饲料安全分析中应用广泛。

发明内容

本发明的目的是提供检测喹噁啉类化合物试剂盒的或试纸条。

本发明提供的检测喹噁啉类化合物的酶联免疫试剂盒，包括抗乙酰甲喹单克隆抗体杂交瘤细胞1A10分泌的单克隆抗体。

抗乙酰甲喹单克隆抗体杂交瘤细胞1A10，简称杂交瘤细胞1A10，已于2012年2月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏号为CGMCC No.5780。

所述试剂盒可为如下1)至4)中的任意一种：

1)包括式(I)所示化合物与载体蛋白的偶联物、所述单克隆抗体和酶标记抗抗体的试剂盒；其中，所述偶联物作为包被原；

2)包括式(I)所示化合物的酶标记物、所述单克隆抗体和抗抗体的试剂盒；其中，所述抗抗体作为包被原；

3)包括式(I)所示化合物的酶标记物和所述单克隆抗体的试剂盒；其中，所述单克隆抗体作为包被原；

4)包括式(I)所示化合物与载体蛋白的偶联物和所述单克隆抗体的酶标记物的试剂盒；其中，所述偶联物作为包被原。

式(I)。

式(I)所示化合物与载体蛋白的偶联物具体如式(II)所示。

式(II)。

所述载体蛋白可为卵清蛋白(OVA)或牛血清白蛋白(BSA)。

所述偶联物中，式(I)所示化合物与载体蛋白的偶联比具体可为(8-10)∶1。所述偶联比指的是摩尔比。式(I)所示化合物与所述载体蛋白具体可通过活性酯法偶联。

所述试剂盒还包括洗涤液、样品浓缩液、底物显色液和终止液中的至少一种。

每1升洗涤液可按照如下方法配制得到：将10ml吐温20、5g叠氮化钠和990ml磷酸盐缓冲液混合，得到洗涤液。所述磷酸盐缓冲液可为pH7.2-7.6、0.005M-0.015M的磷酸盐缓冲液，具体可为的浓度可为pH7.4、0.01M)的磷酸钠缓冲液。

所述样品浓缩液可为浓度为0.03mol/L-0.05mol/L的磷酸盐缓冲液，优选为pH7.4、0.04mol/L的PBS缓冲液。

所述底物显色液包括显色液A和显色液B，可为独立包装的显色液A和显色液B，也可直接将显色液A和显色液B等体积混合得到。所述显色液可为过氧化氢溶液或过氧化脲溶液；所述显色液B可为邻苯二胺(OPD)溶液或四甲基联苯胺(TMB)溶液。所述显色液A具体可为2％(g/100ml)过氧化脲水溶液。所述显色液B具体可为1％(g/100ml)四甲基联苯胺水溶液。

所述终止液具体可为0.2M硫酸水溶液。

以上任一所述试剂盒均可用于检测喹噁啉类化合物。

以上任一所述试剂盒均可用于检测待测样本中是否含有喹噁啉类化合物。

本发明还保护一种检测喹噁啉类化合物的胶体金试纸条，由样品吸收垫、胶体金垫、反应膜和吸水垫组成；沿试纸条的轴向，所述样品吸收垫、所述胶体金垫、所述反应膜和所述吸水垫依次按顺序连接，样品吸收垫的末端与胶体金垫的始端相连，胶体金垫的末端与反应膜的始端相连，反应膜的末端与吸水垫的始端相连；

所述胶体金垫上包被有胶体金标记的单克隆抗体；所述单克隆抗体为抗乙酰甲喹单克隆抗体杂交瘤细胞1A10分泌的单克隆抗体；