[发明专利]与I群禽腺病毒免疫相关融合蛋白及其编码基因与应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种与I群禽腺病毒免疫相关融合蛋白及其编码基因与应用。

背景技术

I群禽腺病毒(fowl adenovirus group I，FAVI)包括从鸡、火鸡、鹅和其他禽类分离的共12个血清型的病毒，其中比较著名的病毒株有鸡胚致死孤儿病毒、鹌鹑支气管炎病毒、鸡包涵体肝炎病毒。近年来，I群禽腺病毒引起了鸡只包涵体肝炎、心包积液肝炎综合征和砂囊糜烂等疾病，虽然I群禽腺病毒常呈阴性感染，但是它与其他病原共同作用于家禽，给养禽业带来较大威胁。

相对于传统疫苗，基因工程疫苗的生产完全在体外进行，无需以易感动物为载体来获得病毒制备活疫苗或者灭活苗；同时，基因工程疫苗不含能引起鸡群发病的成分，因而没有散毒的危险。其中，DNA疫苗是将含有编码抗原基因的质粒DNA直接导入体内，使抗原基因在体内表达，诱导机体产生免疫应答，包括中和抗体、淋巴细胞和辅助T细胞。通过此种疫苗表达的蛋白能够以天然抗原形式被免疫系统识别，热稳定性好、免疫力持久。

鸡白细胞介素2(ChIL-2)是辅助T细胞分泌的淋巴因子，在免疫系统中发挥重要作用，可促进T细胞、NK细胞、B细胞的分化成熟及激活其生物活性，诱导淋巴因子激活杀伤细胞活性，促进干扰素、肿瘤坏死因子等的合成与释放以及抗体生成，可大大增强机体免疫功能，因此ChIL-2作为DNA疫苗佐剂已经被国内外广泛使用。

面对艰难的I群禽腺病毒防治工作，尽快开展相关疫苗研制显得非常必要，DNA疫苗是很好的发展方向。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种与I群禽腺病毒免疫相关融合蛋白及其编码基因。

本发明提供的融合蛋白，包括Hexon蛋白和鸡白细胞介素-2；

所述Hexon蛋白为如下1)或2)所示的蛋白质：

1)由序列表中序列6的自N’末端的第1-914位氨基酸序列组成的蛋白质；

2)将序列6的自N’末端的第1-914位氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由1)衍生的蛋白质；

所述鸡白细胞介素-2为如下3)或4)所示的蛋白质：

3)由序列表中序列6的自N’末端的第933-1075位氨基酸序列组成的蛋白质；

4)将序列6的自N’末端的第933-1075位氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由3)衍生的蛋白质。

上述融合蛋白为如下1)或2)中任一所述的蛋白质：

1)由序列表中的序列6的氨基酸残基序列组成的蛋白质；

2)将序列表中的序列6氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由1)衍生的蛋白质。

上述一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加为不超过10个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加。

上述融合蛋白依次由Hexon蛋白、linker和鸡白细胞介素-2蛋白组成；融合蛋白的氨基酸序列为序列表中的序列6，其中，自N’末端第933-1075位氨基酸为鸡白细胞介素-2蛋白，自N’末端第1-914位氨基酸为Hexon蛋白，自N’末端第915-932位氨基酸为Linker接头。

本发明的另一个目的是提供一种DNA分子。

本发明提供的DNA分子，包括Hexon蛋白的编码基因和鸡白细胞介素-2的编码基因；

所述Hexon蛋白的编码基因为如下1)-3)中任一所述的DNA分子：

1)序列表中序列5自5’末端的第16-2779位核苷酸所示的DNA分子；

2)在严格条件下与1)限定的DNA序列杂交且具有相同功能的DNA分子；

3)与1)限定的DNA序列至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且具有相同功能的DNA分子；

所述鸡白细胞介素-2的编码基因为如下4)-6)中任一所述的DNA分子：

4)序列表中序列5自5’末端的第2825-3265的DNA分子；

5)在严格条件下与4)限定的DNA序列杂交且具有相同功能的DNA分子；