[发明专利]一种结核分枝杆菌标志物HtdY的重组蛋白及其制备方法和临床应用无效
| 申请号： | 201210041980.0 | 申请日： | 2012-02-23 |
| 公开（公告）号： | CN103290030A | 公开（公告）日： | 2013-09-11 |
| 发明（设计）人： | 张舒林;孙战强;宋言峥;赵俊伟;王洪海 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12N15/31 | 分类号： | C12N15/31;C07K14/35;C12N15/70;G01N33/68;G01N33/569;C12R1/32;C12R1/19 |
| 代理公司： | 上海新天专利代理有限公司 31213 | 代理人： | 张泽纯 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 结核 分枝杆菌 标志 htdy 重组 蛋白 及其 制备 方法 临床 应用 | ||
1.一种结核分枝杆菌重组HtdY蛋白的基因，其特征在于，它的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.一种结核分枝杆菌重组HtdY蛋白，其特征在于，它的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
3.根据权利要求2所述的一种结核分枝杆菌重组HtdY蛋白，其特征在于，它来自结核分枝杆菌H37Rv。
4.根据权利要求2所述的结核分枝杆菌重组HtdY蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）结核分枝杆菌菌株基因组DNA的制备；
（2）HtdY基因的扩增；
（3）HtdY基因插入表达质粒；
（4）将构建的表达质粒转化入宿主细胞；
（5）诱导表达蛋白HtdY；
（6）分离纯化诱导表达产物，得到HtdY重组蛋白；
其中，在制备结核分枝杆菌HtdY基因中采用的引物为HtdY-F和HtdY-R，所述引物HtdY-F的核苷酸序列如SEQ ID No: 3所示，所述引物HtdY-R的核苷酸序列如SEQ ID No: 4所示。
5.结核分枝杆菌HtdY蛋白在制备检测或诊断结核病的试剂中的应用。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述HtdY蛋白是具有全长度氨基酸序列的蛋白。
7.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述HtdY蛋白是用基因重组法以结核分枝杆菌DNA为模板扩增出HtdY基因后克隆、表达得到，其氨基酸序列为SEQ ID No: 2。
8.结核分枝杆菌HtdY蛋白或其特异性抗体在制备结核病检测试剂盒中的应用。
9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述HtdY蛋白是具有全长度氨基酸序列的蛋白。
10.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述HtdY蛋白是用基因重组法以结核分枝杆菌DNA为模板扩增出HtdY基因后克隆、表达得到，其氨基酸序列为SEQ ID No: 2。
11.一种结核病检测试剂盒，其特征在于，其组分中的检测抗原是结核分枝杆菌HtdY蛋白。
12.如权利要求11所述的结核病检测试剂盒，其特征在于，所述HtdY蛋白是具有全长度氨基酸序列的蛋白。
13.如权利要求11所述的结核病检测试剂盒，其特征在于，所述HtdY蛋白是用基因重组法以结核分枝杆菌DNA为模板扩增出HtdY基因后克隆、表达得到，其氨基酸序列为SEQ ID No: 2。
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