[发明专利]高纯度氯化两面针碱的制备及其质量控制方法

权利要求书

1.一种高纯度氯化两面针碱制备方法，其特征在于：包括以下工艺过程：以粉碎后的两面针根为原料，加酸性乙醇溶液回流提取三次，第一次加酸性乙醇10－15倍量，加热回流2－5小时；第二次和第三次加酸性乙醇5－8倍量，分别加热回流2－5小时；合并酸醇提取液，回收乙醇，继续浓缩至稠膏状，用氯仿反复研磨，所得沉淀用甲醇溶解，加盐酸至pH调节为2－3，放置后析出淡黄绿色针状结晶，用甲醇重结晶，即可得到氯化两面针碱粗结晶，再用甲醇溶解，超声30－60分钟，加热至80－100℃，趁热过滤，滤液放冷，静置24小时重结晶，析出纯度90－95%淡黄色细针状结晶，再将粗结晶用制备高效液相色谱法分离纯化，色谱柱为C－18柱，利用乙腈－0.1%三氟乙酸为流动相洗脱，流速为5－10 mL/min，检测波长为271nm，柱温为25－35℃；收集氯化两面针碱组分，并对所收集的每一份洗脱液利用HPLC检测，合并保留时间相同而且纯度在90%－98%之间和纯度大于98%以上的氯化两面针碱组分，减压浓缩，得到纯度90%－98%之间以及大于98%以上的氯化两面针碱；

所述的酸性乙醇的盐酸重量含量为10－30%盐酸，乙醇重量含量为40－80%，pH=3－4。

2.根据权利要求1所述的高纯度氯化两面针碱制备方法，其特征在于：所述的乙腈－0.1%三氟乙酸流动相洗脱重量配比为20:80～40:60。

3.根据权利要求1所述的高纯度氯化两面针碱制备方法，其特征在于：所述的HPLC检测为：色谱柱：C－18柱；流动相：乙腈:0.1%三氟乙酸；检测波长：271nm；流速：0.6 mL/min ～1.5mL/min。

4.一种高纯度氯化两面针碱的质量控制方法，其特征在于：采用薄层色谱分析方法和HPLC分析方法。

5.根据权利要求4所述的高纯度氯化两面针碱的质量控制方法，其特征在于：所述的薄层色谱分析方法是：薄层板：硅胶G－0.8%羧甲基纤维素钠，三种展开剂系统：系统（1）氯仿-甲醇比例（12:1－6:1）；系统（2）氯仿-乙醇比例（10:1－5:1）；系统（3）乙酸乙酯-乙醇比例（15:1－8:1），点样：在同一板上，按20mg、40mg、60mg、80mg、100mg不同的浓度梯度点样，置展开缸饱和15min，分别展开，展距：15cm，定位：喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光（365nm）下检视，在薄层色谱中，三种展开剂系统，五个不同浓度的梯度点样，均为单一斑点，未见杂质斑点。

6.根据权利要求4和5所述的高纯度氯化两面针碱的质量控制方法，其特征在于：所述的HPLC分析方法：色谱条件：C－18柱，4.6×25cm；流速：0.6－1.5ml/min；进样量：10－20ml；面积归一化法定量；系统（1）流动相：乙腈:0.1%三氟乙酸溶液比例（33:67－20:80）；检测波长：271nm； 系统（2） 流动相：乙腈:0.1%三氟乙酸比例（33:67－20:80）；检测波长：254nm；系统条件（3）流动相：甲醇:0.1%三氟乙酸比例（50:50－30:70）；检测波长：271nm；

含量与纯度测定：精密称取于105℃干燥至恒重的对照品适量，加流动相制成每1ml含1mg的溶液，在测定条件下，注入液相色谱仪，用两个流动相溶剂系统分别记录色谱图至主成分的出峰保留时间的2.5倍以上，用面积归一化法计算含量，结果测定对照品含量均在98%以上.杂质检查，除溶剂峰外，杂质峰面积总和结果均小于2.0%；

所述的峰纯度检测：取对照品适量，按系统（1），在高效液相色谱仪上，用二极管阵列DAD检测器进行峰纯度检查，HPLC色谱图（>98%），其色谱峰的紫外吸收光谱图、三维图谱以及5点光谱图完全重合，表明为单一纯物质峰。