[发明专利]一种猪瘟脾淋源活疫苗耐热冻干保护剂及制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种猪瘟脾淋源活疫苗耐热冻干保护剂及制备方法，属于动物用病毒活疫苗制造领域。

背景技术

在疫苗制品的领域中，冻干保护剂及其制备工艺是活疫苗生产中的一项关键技术，对疫苗的保存、运输和使用有很大影响。目前，在我国兽用疫苗中，活的冻干疫苗占相当大的比例，国内常用的保护剂主要为牛奶、蔗糖、明胶等，组方简单，保护功能差。如果在2℃-8℃条件下，保存期只有4-6个月，多需要在-15℃以下保存。加上国内传统的兽用生物制品保护剂的研制相对滞后，使成品疫苗的长期保存和运输受限。所以，耐热冻干保护剂的研究是非常急需的，在20世纪80年代，发达国家就已开始进行耐热冻干保护剂的研究。我国在耐热冻干保护剂方面的研究起步较晚，但现在在这方面的研究取得了一定的成果，傅德霞等(1997)将明胶蔗糖保护剂用于鸡新城疫弱毒冻干苗和鸡传染性支气管炎弱毒冻干苗，其免疫效果与牛奶蔗糖保护剂基本相同。王仁耕等(1989)对鸡新城疫I系冻干苗的耐热保护剂的研究表明，2-8℃保存24个月能够达到《规程》标准，主要为牛奶、蔗糖、谷氨酸钠、甘露醇等。沈铭强等(1990)对狂犬病冻干苗耐热保护剂进行了研究，以蔗糖、牛奶、EDTA、甘露醇等材料为主，经2-8℃保存有效期为一年。李道义等(1996)进行了猪瘟冻干苗保护剂的研究，主要成分为CHO、谷氨酸钠、牛血清、脱脂牛奶等，4-8℃保存15-24个月，25℃100天，37℃7天，经检验，物理性状、真空度、水分、安全效力等测定达部颁标准。王栋等(2002)已经研制出一种耐热冻干保护剂，用此保护剂冻干的疫苗在2℃-8℃条件下，保存24个月以后，病毒滴度无明显下降，但仍未达到全面推广应用。

由于冻干保护剂可影响生物制品的质量、效价和稳定性，改变生物制品的生产工艺，提高产品预测能力并增大产品批次间的稳定性，并且耐热冻干保护剂有免疫活性但无药理活性，可在冻干和保存时维持疫苗的稳定性，初次干燥时在适宜的温度下疫苗不倒塌，企业低成本即可获取。

发明内容

本发明的目的是提供一种新型猪瘟脾淋源活疫苗耐热冻干保护剂及其制备方法，降低保护条件，延长使用期并降低使用成本。

一种猪瘟脾淋源活疫苗耐热冻干保护剂，以注射用水为溶剂配制溶液，各组分质量百分比浓度为：明胶3％、聚乙烯吡咯烷酮5％、脱水果糖1％、海藻糖3％、甘氨酸3％、山梨醇3％、谷氨酸钠2％；均为干物质组份。

上述猪瘟脾淋源活疫苗耐热冻干保护剂的制备方法，(1)对可高压灭菌的明胶、聚乙烯吡咯烷酮(K90)，按各自比例溶于注射用水，121℃灭菌15分钟；(2)将不耐高温的物质组份山梨醇、谷氨酸钠、脱水果糖、甘氨酸、海藻糖；均按各自比例溶于注射用水中用孔径0.22μm的滤膜过滤除菌；然后将(1)、(2)混合，即为耐热冻干保护剂，冻干保护剂中各组分质量百分比浓度为：明胶3％、聚乙烯吡咯烷酮5％、脱水果糖1％、海藻糖3％、甘氨酸3％、山梨醇3％、谷氨酸钠2％。使用时按1∶1体积比加入病毒抗原液中，分装后进行冷冻干燥。

本发明的活疫苗耐热冻干保护剂，降低保存条件，延长保存期，降低使用成本及其提高疫苗的免疫效力，使活疫苗的储存、运输和使用都更方便、经济。本发明的的制剂在2-8℃条件下可保存24个月以上，能达到《中华人民共和国兽医生物制品质量标准》中规定的各项指标。

具体实施方式

以下结合具体实施例，对本发明进行详细说明。

一种新型猪瘟脾淋源活疫苗耐热冻干保护剂，配比为：明胶3g、聚乙烯吡咯烷酮5g、脱水果糖1g、海藻糖3g、甘氨酸3g、山梨醇3g、谷氨酸钠2g，注射用水80g，可得到100g猪瘟脾淋源活疫苗耐热冻干保护剂。

猪瘟脾淋源活疫苗耐热冻干保护剂的制备方法，(1)对可高压灭菌的明胶、聚乙烯吡咯烷酮(K90)，按各自比例溶于注射用水，121℃灭菌15分钟；(2)将不耐高温的物质组份山梨醇、谷氨酸钠、脱水果糖、甘氨酸、海藻糖；均按各自比例溶于注射用水中用孔径0.22μm的滤膜过滤除菌；分别完成除菌后将(1)、(2)两种成分混合，即为耐热冻干保护剂，使用时按1∶1体积比例加入病毒抗原液中，分装后进行冷冻干燥。

技术参数及检测方法

1.产品的物理性状、无菌检验、支原体检验、外源病毒检验、安全检验、剩余水分测定和真空度测定按《中华人民共和国兽医生物制品规程》的方法及标准进行。

2.冻于周期不超过48h。

3.病毒含量测定及标准