[发明专利]一种蛇毒镇痛多肽纳米囊及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及医药制造领域，具体涉及一种蛇毒镇痛多肽纳米囊制备方法及其用于镇痛药物的应用。

背景技术

疼痛是机体受到伤害性刺激后的一种保护性反应，也是许多疾病常见的症状之一。疼痛不仅使患者感到痛苦.还可能引起生理功能紊乱，剧烈的疼痛甚至可导致休克，故须合理使用药物缓解疼痛，防止可能产生的生理功能紊乱。目前临床上所用的镇痛药主要有阿片类镇痛药和非阿片类镇痛药，前者虽然具有较好的镇痛效果，但长期使用后容易产生依赖性，故在临床应用上受到严格的限制；后者主要是阿司匹林等解热镇痛药，仅限于轻度疼痛的治疗。

蛇毒是所发现的非成瘾性镇痛药，由于蛇毒中含有多种生物活性蛋白，且蛇毒种类众多，是天然蛋白的贮藏库，为镇痛多肽的筛选提供了较大的可能。眼镜蛇神经毒素是最早发现的眼镜蛇毒中镇痛多肽。王晓辉等报道自尖吻蝮蛇毒中分离出镇痛组分(王晓辉，王化丽，李旭.尖吻蝮蛇蛇毒中镇痛成分的研究.中国生化药物杂志，2001，22(4)：198～199)，叶勇等报道了从江浙蝮蛇毒中分离出一种碱性多肽，发现其毒性低，无耐受和依赖性，并有中枢镇痛作用(叶勇，姚广涛，王泽时.江浙蝮蛇毒镇痛组分的分离纯化和理化性质.中国药理与毒理学杂志，2004，18(6)：453-459)。申请号201110065634.1公开了一种眼镜蛇毒直接加热制成镇痛药物的方法，但蛇毒未经纯化，镇痛多肽含量低。

由于蛇毒多肽在体内易于降解，加上分子量较大，难以透膜吸收，因此其生物利用率不高，镇痛效果欠佳。目前尚无将蛇毒多肽分离纯化，制成纳米囊的报道。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种蛇毒镇痛多肽纳米囊及其制备方法和应用。该方法是针对蛇毒镇痛多肽，利用高分子囊材的自组装作用，制备蛇毒镇痛多肽纳米囊，提高了蛇毒多肽的稳定性，并易被细胞直接吸收，发挥更好的镇痛效果。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种蛇毒镇痛多肽纳米囊的制备方法，包括如下步骤：

(1)将囊材用溶剂制成2～10％质量分数的囊材溶液，加入0.5～5％质量分数的乳化剂制成混合液，所述乳化剂为非离子表面活性剂；

(2)将蛇毒镇痛多肽用pH4.5～7.5的磷酸缓冲液溶解，配制成5～20％质量分数的溶液，与囊材混合液按体积比1∶3～10混合，搅拌乳化0.5～2小时，形成初乳，再与含0.1～1％质量分数的另一囊材的水溶液按体积比1∶1～10混合，搅拌乳化0.5～2小时，形成复乳；

(3)调节复乳pH为2～6，过微孔滤膜，加入复乳体积5～20倍的水，静置分离，沉淀部分冷冻干燥，即制得蛇毒镇痛多肽纳米囊。

优选地，步骤(1)、(2)所述囊材选自聚乳酸、聚羟基乙酸、多聚赖氨酸、多聚谷氨酸、聚酸酐、聚乙二醇、聚己内酯、壳聚糖和海藻酸盐中的一种或几种。

优选地，步骤(1)所述溶剂为丙酮、乙醇、异丙醇、乙酸乙酯和二氯甲烷中的一种或几种。

优选地，步骤(1)所述乳化剂为单甘酯、吐温20、吐温80、司盘60、蔗糖脂肪酸酯和泊洛沙姆中的一种或几种。

优选地，步骤(1)所述的蛇毒多肽为眼镜蛇或蝮蛇中分离的镇痛多肽。

优选地，所述蛇毒镇痛多肽的制备方法为：将眼镜蛇毒或蝮蛇毒用10倍重量、pH4.5～7.5的磷酸缓冲液溶解后，过阳离子交换树脂柱CM-SephadexC-25，用含1mol氯化钠的pH4.5～7.5的磷酸缓冲液洗脱，收集洗脱液，将其冷冻浓缩后过凝胶层析柱Sephadex G-50，用0.1mol氯化钠的pH4.5～7.5的磷酸缓冲液洗脱，收集色谱峰，脱盐后冷冻干燥，得蛇毒镇痛多肽。

所述的蛇毒镇痛多肽纳米囊可制成镇痛药品，可制成外用、口服或注射用药剂型的任何一种。

本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：

(1)本发明将蛇毒镇痛多肽分离纯化并制成镇痛药物，增强了药物的镇痛效果，并避免了其它成分引起的毒副作用。

(2)本发明的蛇毒镇痛多肽纳米囊制剂，组织相容性好，易被组织细胞吸收，并提高了蛇毒镇痛多肽的稳定性。

(3)本发明的蛇毒镇痛多肽纳米囊制备方法简单易行，可以快速、批量生产。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实施例1