[发明专利]一种发酵培养基及用该培养基发酵生产丁醇的方法

权利要求书

1.一种生产丁醇的发酵培养基，其特征是每升该培养基中含有玉米芯稀酸水解糖液总还原糖27.5~37g，碳酸氢铵1.4~2.2g，硫酸亚铁0.2~0.4g，碳酸钙2.5~3.5g，玉米浆0.8~1.2g，其余为水，pH 6.6~6.8。

2.根据权利要求1所述的发酵培养基，其特征在于：所述的玉米芯稀酸水解糖液是将玉米芯与1%~2%(wt)的H₂SO₄按质量比1:4~1:6混合，在121℃~125℃下水解120~150min，冷却后抽滤，Ca(OH)₂调节pH为5.9~6.1，然后抽滤得到水解糖液。

3.一种用权利要求1所述的发酵培养基发酵生产丁醇的方法，包括菌种活化、种子培养、厌氧发酵三步骤，其特征在于：所述厌氧发酵步骤中，接种量为8～10%（v/v），温度为35～40℃，发酵罐在接种后通入纯N₂，10～20min后停止通气，搅拌速度在100～300 rpm，发酵时间在60～84 h。

4.根据权利要求3所述的发酵生产丁醇的方法，其特征在于：所述菌种为贝氏梭菌Clostridium beijerinckii NCIMB8052或者其诱变菌株Clostridium beijerinckii IB4. CCTCC No.M2010310。

5.根据权利要求3所述的发酵生产丁醇的方法，其特征在于：所述菌种活化步骤中，将50mL的血清瓶中加入培养基20～30mL，通入纯N₂，115～121℃灭菌15～30min，冷却后接入1mL甘油管中冻存的菌种，静置于恒温培养箱中，培养温度为30～40℃，活化时间为12～14h，得到活化的种子液。

6.根据权利要求3所述的发酵生产丁醇的方法，其特征在于：所述种子培养步骤中，培养时将500mL血清瓶中加入培养基100～400mL，通入纯N₂，115～121℃灭菌15～30min，冷却后接入活化的种子液，培养温度为30～40℃，在恒温培养箱中培养，培养时间为8～12h，用于发酵罐接种。