[发明专利]党参多糖硒化的方法及其应用

说明书

技术领域

本发明属于药物合成领域，具体涉及党参多糖的硒化方法及其应用。

背景技术

党参为传统常用中药，味甘性平，具有补中益气，健脾益肺之功能，用于治疗脾肺虚弱、气短心悸、食少便溏、虚喘咳嗽、内热消渴等症，并常作为人参的替代品。据文献报道，党参中所含的化学成分比较复杂，包括多糖类、木质素苷类、酚酸类、萜类、甾类等。

党参多糖是党参中的有效成分之一，传统控制和评价党参品质都是通过测定其中多糖的含量。现代药理学研究证实党参多糖具有多种生物学活性，其中以抗肿瘤、抗氧化及提高免疫力活性研究较多也较为深入。

硒是人体必须的微量元素，是谷胱甘肽过氧化物酶的主要活性成分，人体缺硒可患克山病、大骨节病等，硒在动物试验中证实具有抗多种致癌物质的作用。硒的存在形式分为无机硒和有机硒两种，与无机硒相比，有机硒因其具有更高的生物活性和更低的毒性而易被生物体吸收利用。有机硒包括硒多糖、硒蛋白、硒核酸等。硒多糖作为重要的有机硒种类，不但具有无机硒的活性还具有多糖的各种生理功能。

将硒与党参多糖有机结合不但可以提高党参多糖的功效，还能提高硒在体内的吸收。但现有研究表明，党参多糖中天然硒含量极低，大约为12ng/g，故如何提高党参多糖中的硒含量，最大程度发挥党参多糖及硒的药用价值是党参多糖药物开发中需要解决的问题。

发明内容

本发明目的是解决党参多糖中硒含量低的问题，提供一种党参多糖硒化的方法及其应用。

本发明实现上述目的的技术方案如下：

一种党参多糖硒化的方法，该方法包括如下步骤：在搅拌下，将亚硒酸加入到党参多糖的水溶液中，再加入催化剂，然后在50～70℃下反应4～8小时，冷却，分离纯化得到硒化的党参多糖产物，其中，所述催化剂为氯化钡。

进一步，亚硒酸与党参多糖的重量比为（0.5～1.5）：1。

进一步，氯化钡与党参多糖的重量比为（1～2）：1。

进一步，反应中，按反应液体积的0.2%～0.6%加入硝酸，可提高硒化反应的产率。

进一步，所述分离纯化可以采用醇沉与透析相结合的方法，具体步骤是向反应液中加入乙醇至合适量，静置过夜，得到沉淀物，沉淀物再用水溶解，所得溶液再经透析纯化，纯化后的溶液于40～70℃下浓缩，再经冷冻干燥得到硒化的党参多糖产物。

更进一步，加入乙醇调节反应液中的乙醇体积浓度至60～85%。

更进一步，加入乙醇调节反应液中的乙醇体积浓度至80%。

为防止反应液中的催化剂氯化钡在上述醇沉步骤中一同沉淀，可在醇沉步骤之前，加入适量的硫酸钠，将钡离子沉淀除去后，再进行党参多糖硒化产物的分离纯化。

进一步，采用上述方法得到产物的硒含量为500～5000μg/g。

进一步，采用上述方法得到的产物在制备抗肿瘤药物中的应用。

进一步，采用上述方法得到的产物在制备提高免疫力的药物或保健品中的应用。

有益效果：本发明采用亚硒酸对党参多糖进行修饰，能够将党参多糖的硒含量提高至500～5000μg/g，硒化的党参多糖与未硒化的党参多糖相比，其抗肿瘤活性和提高免疫活性均有明显提高。

附图说明

图1为响应曲面图。

具体实施方式

以下结合实施例及附图对本发明作进一步说明。

实施例1 党参多糖的提取

采用水煎-醇沉法提取党参多糖，具体过程为：取党参药材1kg，粉碎，置于圆底烧瓶中，用85~95%（V/V）乙醇回流2次，每次2小时，药渣自然晾干后加入5～12倍量的水煎煮4次，每次2小时，合并药液，水浴浓缩，浓缩倍数为4，静置过夜，弃去沉淀，加入95%乙醇使乙醇浓度达到80%，静置过夜，离心得到沉淀，沉淀再用乙醇洗涤，干燥，得到粗党参多糖。粗党参多糖通过脱色素、除蛋白处理后，得到多糖含量达50%以上的党参多糖。

实施例2 党参多糖的修饰

本实验考查了亚硒酸与党参多糖质量比、反应时间、反应温度三个因素对党参多糖硒化的影响。采用Box-Behnken法，选取的三个变量分别为亚硒酸与党参多糖质量比（X1）、反应时间(X2)和反应温度(X3)，按方程ci=(Xi-X0)/△X对自变量进行编码，其中，ci为变量的编码值， Xi为变量的真实值，X0为实验中心点变量的真实值，△X为变量的变化步长。各变量及水平见下表