[发明专利]一种犬α干扰素衍生物的制备方法与应用

权利要求书

1.一种制备犬α干扰素衍生物的方法，包括以下步骤：

1)用氨基保护剂封闭犬α干扰素中赖氨酸残基的ε氨基，得到ε氨基被封闭的犬α干扰素；

2)使所述ε氨基被封闭的犬α干扰素的位于氨基端的α氨基和醛基化的单甲氧基聚乙二醇发生亲核取代反应；反应完毕后，去除所述氨基保护剂，得到所述犬α干扰素衍生物；所述犬α干扰素衍生物为犬α干扰素的α氨基与醛基化的单甲氧基聚乙二醇发生亲核取代反应形成酰胺键后生成的化合物，所述犬α干扰素衍生物分子量为40KD。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤2)中所述醛基化的单甲氧基聚乙二醇为丙醛基修饰的单甲氧基封端的直链聚乙二醇，分子量为20KD。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述步骤1)中所述氨基保护剂为二甲基马来酸酐，其用量为所述犬α干扰素氨基端的α氨基和赖氨酸残基的ε氨基的摩尔数之和的3-5倍；

所述封闭是在0℃，pH值为8.5的磷酸盐缓冲溶液中进行；

所述磷酸盐缓冲溶液的溶质为43mM的Na₂HPO₄和14mM的KH₂PO₄，溶剂为水。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述步骤1)中所述犬α干扰素在所述磷酸盐缓冲溶液中的含量为2mg/ml-10mg/ml。

5.根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：所述步骤2)中所述亲核取代反应是在如下条件下进行的：温度为37℃，使用NaBH₃CN作为催化剂；

所述NaBH₃CN的用量与所述步骤1)中所述犬α干扰素的摩尔数相同。

6.根据权利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于：所述步骤2)中所述醛基化的单甲氧基聚乙二醇的用量为步骤1)中所述犬α干扰素摩尔数的2-10倍；去除所述氨基保护剂的方法是将反应体系的pH调至6.0。

7.由权利要求1-6中任一所述方法制备得到的犬α干扰素衍生物。

8.权利要求7所述的衍生物在制备病毒抑制剂中的应用。