[发明专利]一种依诺肝素钠及其生产纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种依诺肝素钠及其生产纯化方法。

背景技术

肝素钠（Heparin）是广泛存在于人和哺乳动物组织中的生物活性物质，属于天然黏多糖类，其化学结构由右旋葡萄糖醛酸和右旋葡萄糖胺交替连接而成，分子量分布5,000－30,000 道尔顿(平均分子量为 20,000 道尔顿)。肝素钠是迄今为止人类已知的分子结构最复杂的有机化合物之一。肝素钠具有很强的抗凝血、抗血栓功能，即抗Ⅱa 和抗Xa 功能。长期使用普通肝素钠有诱导血小板减少症的风险（3%），而血小板减少症能导致血栓症和死亡率的增加。

依诺肝素钠（Enoxaparin Sodium）为低分子肝素类（low molecular weight heparin，简称LMWH）品种之一，欧洲药典（EP）7.0版对依诺肝素钠制备方法简要描述为：依诺肝素钠是一种低分子肝素钠盐，它通过对肝素的苄基酯衍生物进行碱解聚而获得。美国专利US005389618A即采用这种碱解聚的β-消除法，其基本步骤为：以猪粘膜肝素为起始原料，经肝素季铵盐制备、肝素苄酯的制备、对肝素苄酯进行碱解聚、以酸中和、醇沉淀，精制、脱色，脱水干燥，得到依诺肝素钠成品。

与普通肝素钠相比，“依诺肝素钠”具有更强的抗凝效能，引起血小板减少的副作用明显降低，出血并发症亦减少、皮下注射吸收好、体内半衰期较长等诸多优点，市场占有率约占肝素类产品2/3以上。

发明内容

本发明的目的是为了克服以上的不足，提供一种降低生产成本、提高产品质量、简化生产工艺的依诺肝素钠及其生产纯化方法。

本发明是通过以下技术方案来实现：一种依诺肝素钠，依诺肝素钠的平均分子量在于3500-5500道尔顿之间，溶血栓生物活性100-125 IU/mg，抗Xa与抗IIa的比值在3.3-5.3之间。依诺肝素钠为不同种类的混合物，混合物的基本组成为：多糖链分子量小于2000道尔顿的为12%～20%，多糖链分子量在2000～8000道尔顿的为68%～88%，多糖链分子量大于8000道尔顿少于18%。

一种依诺肝素钠的生产纯化方法，包括以下步骤：

1) 常温下将1重量份的粗品肝素钠溶解在15～20重量份的去离子水中，将2～3重量份的苄索氯铵溶解在4～6重量份的去离子水中混合搅拌均匀，将苄索氯铵水溶液加入到肝素钠水溶液中，进行充分的盐化反应，反应时间为1小时，将所得的肝素苄索氯铵盐静置，真空抽滤，抽滤后得固体，再将得到的固体用去离子水搅拌洗涤后抽滤，这样洗涤、抽滤两次后得新的固体，将新的固体在40～60℃、1～2KPa真空条件下干燥20～30小时，得到干燥的肝素苄索氯铵盐；

2) 将1重量份的肝素苄索氯铵盐溶解在5～8重量份的干燥的二氯甲烷中，加入1～3重量份的氯化苄，在25～45℃条件下，将混合液搅拌，使其进行酯化反应，酯化反应20～30小时后停止，反应后的溶液为肝素苄酯反应液，将肝素苄酯反应液加入到等体积的10%醋酸钠甲醇溶液中，固体析出，减压抽滤，将抽滤之后得到的固体物用甲醇搅拌洗涤过滤两次，固体物在50～60℃条件下恒温干燥，得肝素苄酯盐粗品，酯化率9-14%；

3) 将上述制备的1重量份的肝素苄酯盐粗品在搅拌条件下，溶解到8～12重量份的10%氯化钠水溶液中，将混合液加入到20-30重量份的甲醇中，固体析出，减压抽滤，得到的固体物用甲醇搅拌洗涤过滤两次，固体于50～60℃条件下恒温干燥，得纯肝素苄酯；

4) 将上述1重量份的纯化肝素苄酯溶解在15～20重量份的去离子水中，将0.2 N氢氧化钠水溶液加入，于55～70℃温度下进行降解反应，反应时间为30～70分钟，反应后的溶液为反应液，将反应液冷却至室温，稀盐酸调节PH至中性，加入15 %氯化钠，溶解过滤，将清液加入到1.6-1.8重量份的量甲醇中，析出固体，将固体离心、洗涤，固体在45～60℃的条件下干燥，得依诺肝素钠粗品；

5) 将1重量份的依诺肝素钠粗品溶解在40～60℃的8～11重量份的去离子水中，用氢氧化钠调节混合液的pH值至9～11，过滤，加入水溶液量的1%～3%的双氧水，调节混合液的pH值至9～11，保温反应1～3小时，加入10%氯化钠，调节pH值至6～8，过滤，将反应液加入到1.6-1.8重量份的甲醇溶剂中，析出沉淀，离心，产品喷雾干燥，得精品依诺肝素钠。