[发明专利]一种醋酸加尼瑞克的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于药物化学技术领域，尤其涉及一种醋酸加尼瑞克的制备方法。

背景技术

醋酸加尼瑞克，英文名为Ganirelix Acetate，分子式为C84H121ClN18O17，分子量为1690.42294，是一种合成的十肽化合物，结构如下：

醋酸加尼瑞克与内源性促性腺素释放素(gonadotropin-releasing hormone，GnRH/LHRH)类似，是GnRH的拮抗剂，其可竞争性拮抗促性腺的GnRH受休，从而变异途径，引起快速、可逆性地抑制促性腺激素中促黄体生成素(luteinizing hormone，LH)和促卵泡激素(follicle-stimulating hormone，FSH)分泌，且醋酸加尼瑞克抑制垂体分泌LH比抑制分泌FSH更显著，从而降低性激素的产生。醋酸加尼瑞克能够通过抑制中周期GnRH对LH诱导波动，抑制排卵、卵母细胞成熟分裂和黄体化。对于患有卵巢过度刺激症的妇女，醋酸加尼瑞克能够预防LH波动及相关刺激，并提高植入和妊娠比率。用醋酸加尼瑞克治疗卵巢刺激病人，发现在核酸成熟、卵质形态学、卵膜弹性、受精及分裂率方面与LHRH拮抗剂-亮丙瑞林没有差别，并且具有足够质量适合转移的胚胎数量也是相同的。所以说醋酸加尼瑞克具有很高的药用价值和广阔的市场前景。

目前，现有的醋酸加尼瑞克的制备主要按照国际专利US 4801577、US 5212288、US 5767082公开的一种BOC策略的固相合成方法。然而，该方法工艺落后、成本高、醋酸加尼瑞克收率低，且对环境污染大，不适合醋酸加尼瑞克的产业化生产。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是针对现有技术的缺陷，提供一种收率高的醋酸加尼瑞克的制备方法。

为实现本发明的目的，本发明采用如下技术方案：

一种醋酸加尼瑞克的制备方法，包括以下步骤：

1)Fmoc-D-Ala-OH和替代度为0.3～1.1mmol/g的氨基树脂反应合成Fmoc-D-Ala-氨基树脂；

2)Fmoc-D-Ala-氨基树脂采用逐一偶联的方式偶联Fmoc保护基团的其他氨基酸，得到加尼瑞克多肽树脂；

3)加尼瑞克多肽树脂进行乙酰化反应，然后裂解得到加尼瑞克粗肽，纯化、冻干得醋酸加尼瑞克。

本发明所述醋酸加尼瑞克的制备方法采用Fmoc/tBu合成策略，以合适替代度的氨基树脂为载体，逐个偶联Fmoc保护基团的氨基酸，乙酰化后，裂解多肽树脂脱除侧链保护基，纯化得到加尼瑞克醋酸盐醋酸加尼瑞克。

优选的，步骤1)所述氨基树脂为Rink Amide树脂、Rink Amide-MBHA Resin树脂、Rink Amide-BHA Resin树脂、Rink Amide-AM Resin树脂、sieber Resin树脂或Sieber-AM树脂。

进一步的，所述氨基树脂的替代度优选为0.5～1.0mmol/g。

本发明所述制备方法步骤2)通过多肽固相合成法采用从C端向N端逐一偶联的方式从Fmoc-D-Ala-氨基树脂N端逐个加入Fmoc保护基团的氨基酸合成加尼瑞克多肽树脂。其中，步骤2)所述逐一偶联方式所使用的偶联剂优选为二异丙基碳二亚胺/1-羟基苯并三唑、(苯并三唑-1-氧)三吡咯烷子基磷鎓六氟磷酸盐/1-羟基苯并三唑、(苯并三唑-1-氧)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟硼酸盐/1-羟基苯并三唑、苯并三唑-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐/1-羟基苯并三唑或(7-偶氮苯并三氮唑-1-氧)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐/1-羟基-7-偶氮苯并三唑体系。在某一些具体实施方式中，所述偶联剂为二异丙基碳二亚胺/1-羟基苯并三唑体系。

本发明步骤2)所述逐一偶联的Fmoc保护基团的其他氨基酸分别为Fmoc-Pro-OH、Fmoc-homoArg(Et)₂-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-D-Arg(Et)₂-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-3-(3-pyridyl)-D-alanine、Fmoc-4-Chloro-D-Phe-OH、Fmoc-D-2-Nal-OH。

在某些具体实施方式中，步骤2)所述逐一偶联的方式中每一个氨基酸的偶联方法具体包括以下步骤：

a、洗涤：DMF和DCM交替洗涤2到3次，溶剂的用量为3-5mL/g树脂；