[发明专利]一种柞蚕卵巢细胞培养基及其应用有效
| 申请号： | 201210027052.9 | 申请日： | 2012-02-07 |
| 公开（公告）号： | CN102618487A | 公开（公告）日： | 2012-08-01 |
| 发明（设计）人： | 王林美;李树英;岳冬梅;范琦 | 申请（专利权）人： | 辽宁省农业科学院大连生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 大连东方专利代理有限责任公司 21212 | 代理人： | 贾汉生 |
| 地址： | 116024 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 柞蚕 卵巢 细胞 培养基 及其 应用 | ||
1.一种柞蚕卵巢细胞培养基MLM-45，每配制1000mL，其具体组成成分及用量如下：
分别称取上述组分，加蒸馏水至1000mL，调pH6.2-6.4，过滤除菌，4℃保存；
其中：
(a)每配制1000mL的5倍浓缩的MLM-AAS，其具体组成成分及用量如下：
分别称取上述组分，加蒸馏水至1000mL，过滤除菌，-20℃保存；
(b)每配制1000mL的10倍浓缩的MLM-Salt，其具体组成成分及用量如下：
分别称取上述组分，加蒸馏水至1000mL，过滤除菌，4℃保存；
(c)每配制100mL的1000倍浓缩的MLM-Vit，其具体组成成分及用量如下：
分别称取上述组分，加蒸馏水至100mL，过滤除菌，-20℃保存。
2.根据权利要求1所述的MLM-45培养基，其特征在于：用10mol/L KOH调整pH。
3.根据权利要求1所述的MLM-45培养基，其特征在于：用0.22μm或0.45μm的微孔滤膜过滤除菌。
4.如权利要求1、2或3中任一项所述的MLM-45培养基在培养细胞中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：培养柞蚕卵巢细胞的条件为：
使用前，向MLM-45培养基中，按20％的体积比加入胎牛血清，按1％的体积比加入青链霉素混合液；青链霉素混合液中青霉素、链霉素的浓度均为10,000单位/mL；
细胞培养温度为26～28℃；
细胞培养pH为6.2～6.4；
细胞培养渗透压值为315-350mOsm/kg。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：培养柞蚕卵巢细胞的条件为：
细胞培养温度为27℃；
细胞培养pH为6.3；
细胞培养渗透压值为325mOsm/kg。
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