[发明专利]鸡血藤提取物及其应用和异甘草素的新用途

说明书

技术领域

本发明涉及鸡血藤提取物及异甘草素的新用途，具体涉及含异甘草素的鸡血藤提取物及异甘草素在制备预防和治疗三阴性乳腺癌药物中的应用。

背景技术

鸡血藤为豆科(Leguminosae)密花豆属(Spatholobus)植物密花豆(Spatholobus suberectus Dunn)的干燥藤茎。是宋以后发现的养血活血作用，近年来有少量的文献报道，此药有抗肿瘤作用，我们对此药开展系统的研究。

近年有研究发现鸡血藤及其提取物具有抗肿瘤的活性，但对乳癌，特别是三阴性的乳癌(这一特殊的类型乳癌)未见报道。

众所周知，乳癌是一类生物学特征相对特殊的肿瘤，是女性最常见的恶性肿瘤之一，其发病率高、严重威胁妇女的心身健康。根据肿瘤对激素的依赖情况，经过免疫组化检测后雌激素受体(estrogen receptor，ER)、孕激素受体(progesterone receptor，PR)以及人表皮生长因子受体2(HER2)均表达为阴性的乳腺癌患者由于缺乏特异的靶向治疗，预后较差，此为三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer，TNBC)。

Anders等统计数据表明，全球每年约100万妇女确诊为乳腺癌，其中约17％为三阴性乳腺癌。有研究表明非洲裔美国女性三阴性乳腺癌的发病率为白人妇女的2倍左右，韩国报道的三阴性乳腺癌比例为14.7％，日本为15％，中国目前尚无多中心、大样本的相关研究数据报道，但有报道称其比例应低于黑种人且高于白种人。不同种族间的发病差异是基因及其突变是造成这些差异的根本原因。

三阴性乳腺癌以侵袭性的临床表现为特征，与其他类型乳癌相比，有着较差的总生存率和无病生存期；腋窝淋巴结转移率低，且内脏(如肺)转移的发生较早；局部复发率较高，复发危险多发生在治疗后的1-3年。在临床病理学方面，三阴性乳腺癌拥有肿瘤直径大、肿瘤细胞多存在中央坏死、有较高的增殖活性。

前期的研究发现该药能抑制乳酸脱氢酶-A(LDH-A，是糖酵解途径中最后一步的关键酶，它在供氧充足的正常细胞中基本不表达，然而在各种肿瘤细胞中，由于其线粒体功能缺陷和缺氧微环境的影响，LDH-A表达明显增加)。LDH-A表达下调，LDH-A活性降低，能有效的阻止有氧糖酵解，让肿瘤无法获取能量，从而导达抑制肿瘤的作用。

鉴于乳癌对糖代谢途经的特殊依赖性，抑制有氧糖酵解已经成为抑制乳癌细胞的重要途径之一，并成为抗乳癌新的靶向重要手段之一。抑制糖酵解可以作为乳癌肿瘤治疗的新策略。

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种含异甘草素的鸡血藤提取物及活性部位在制备预防和治疗三阴性乳腺癌药物中的应用；

本发明的另一个目的在于提供异甘草素在制备预防和治疗三阴性乳腺癌药物中的应用。

本发明的另一个目的在于提供一种治疗三阴性乳腺癌的药物组合物。

本发明的另一个目的在于提供一种药物组合物制备治疗三阴性乳腺癌药物中的应用。

本发明所述鸡血藤提取物为鸡血藤水提取物或乙醇提取物；

所述鸡血藤水提取物优选60-120℃水提取1-8次；更优选提取2-5次；

所述鸡血藤乙醇提取物，优选10-95％乙醇提取，更优选20-80％乙醇提取，更优选30-70％乙醇提取，更优选40-70％乙醇提取；提取方式可以选择采用渗漉、回流、浸渍或超声提取；优选提取1-8次；更优选提取2-5次；

本发明所述鸡血藤提取物优选上述鸡血藤水提物、乙醇提取物用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇依次先后萃取或择一萃取得到的提取物；

萃取得到的提取物进一步优选上大孔树脂，先用水洗脱，后依次用浓度逐渐增大的乙醇液洗脱，收集高浓度乙醇洗脱物即为鸡血藤活性部位；

本发明提供一种新的含异甘草素的鸡血藤提取物，该提取物是由如下方法制备的：鸡血藤水提取或乙醇提取后用正丁醇萃取，萃取物经常规方法上大孔树脂，先用水洗脱，后在10-95％乙醇浓度范围内依次用浓度逐渐增大的乙醇液洗脱，其中包括用60-90％乙醇洗脱，收集60-90％乙醇洗脱物，即得；

优选的，所述大孔树脂为弱极性的，进一步优选为D101大孔树脂；

所述鸡血藤水提取优选60-120℃水提取1-8次；更优选提取2-5次；

所述鸡血藤乙醇提取，优选10-95％乙醇提取，更优选20-80％乙醇提取，更优选30-70％乙醇提取，更优选40-70％乙醇提取；提取方式可以选择采用渗漉、回流、浸渍或超声提取；优选提取1-8次；更优选提取2-5次；