[发明专利]猪传染性胸膜肺炎三价灭活疫苗及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种猪传染性胸膜肺炎灭活疫苗，特别是指一种猪传染性胸膜肺炎多价灭活疫苗，属于兽药疫苗领域。

背景技术

猪传染性胸膜肺炎(Pocrine contagious pleuropneumonia，PCP)是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae，APP)引起的一种猪传染性呼吸道疾病。该病发生于各年龄段猪只，发病率和死亡率在20％以上，以肺损伤、出血坏死、纤维化为特点，临床特征可见于急性和慢性感染。慢性感染可致日增重下降，生长缓慢，饲料利用率低。该病于1957年由Pattiosn等首次报道，此后逐渐扩散，目前已遍布世界各地。给世界养猪业造成了严重的经济损失。

猪场内胸膜肺炎的综合防制必须结合免疫接种、治疗及饲养管理等多方面的措施。对感染猪群使用抗菌药物治疗可以减少死亡率。全群预防可采用持续或“脉冲式用药”(间歇性地集中短时间大剂量用药)的方法，但随着耐药性问题越来越突出，预防和控制本病最有效的措施仍然是疫苗免疫接种。目前预防本病的商品化疫苗主要是灭活疫苗。

目前国内外上市的灭活疫苗均由油佐剂制备成油包水(W/O)型疫苗，而油相为矿物油。矿物油是各种饱和烃的混合物，各种矿物油的性能各有差异。造成这种差异的原因是不同矿物油中所含的烃类各不相同，这些烃类的理化性质对佐剂的活性以及副作用有重要的影响。矿物油不能被代谢，因此会产生一系列的副作用，包括溃疡、肉芽肿、发热等，易形成残留。此外，矿物油以及其中的组分如姥鲛烷、正十六烷等会引起佐剂性关节炎等自身免疫反应。

我国于1987年首次报道本病的临床病例，目前我国20多个省市都已报道有此病的发生，可见猪传染性胸膜肺炎在我国已广泛存在并流行。但在我国流行的APP血清型较多，其中以1、2、3、5和7型最多。由于本病可以经空气和接触传染，所以集约化养殖程度越高的国家和地区发病越严重。目前对于该疫病的预防和控制最有效的措施仍然是疫苗免疫接种。

发明内容

有鉴于此，本发明的主要目的在于提供一种猪传染性胸膜肺炎三价灭活疫苗及其制备方法，以有效地预防和控制猪传染性胸膜肺炎在养殖场中发生；本发明另一目的在于还提供一种使用水性佐剂的猪传染性胸膜肺炎三价灭活疫苗，最大程度地减少了应激反应，并持续地提高免疫保护作用。

技术方案

一种预防和治疗猪传染性胸膜肺炎的猪传染性胸膜肺炎三价灭活疫苗，所述猪传染性胸膜肺炎三价灭活疫苗包括猪胸膜肺炎放线杆菌血清1、5、7型菌株抗原。

优选地，本发明所述的猪传染性胸膜肺炎灭活疫苗，包括猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清1、7型菌株抗原与猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清2、3、5菌株抗原的一种或任意二种，形成猪传染性胸膜肺炎三价或四价灭活疫苗。

优选地，发明人通过仔细调研流行病源地的发病情况，严格筛选出了三株猪胸膜肺炎放线杆菌。即本发明的三价灭活疫苗中抗原为配合良好，免疫原性优良的灭活的猪胸膜肺炎放线杆菌血清1、5、7型抗原；所述猪胸膜肺炎放线杆菌分别为猪胸膜肺炎放线杆菌血清1型LC株(Actinobacillus pleuropneumoniae serotype 1 strain LC)，保藏号CCTCC M 2011458；猪胸膜肺炎放线杆菌血清5型YC株(Actinobacillus pleuropneumoniae serotype 5 strain YC)，保藏号CCTCC M 2011459和猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型YS株(Actinobacillus pleuropneumoniae serotype 7 strain YS)，保藏号CCTCC M 2011460；上述三株菌株的保藏单位为中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC)，保藏日期为2011年12月13日，保藏地址为中国武汉市武汉大学。

优选地，本发明所述的猪传染性胸膜肺炎三价灭活疫苗中，所述猪胸膜肺炎放线杆菌血清1、5、7型抗原含量为灭活前大于1×10⁹CFU/ml。

优选地，本发明所述的猪传染性胸膜肺炎三价灭活疫苗中，灭活的方法为使用甲醛灭活；更优选地，为使用0.1％-0.3％W/V的甲醛水溶液灭活，灭活条件为37℃，48h。

优选地，本发明所述的猪传染性胸膜肺炎三价灭活疫苗中，还包括最终浓度为0.01％的硫柳汞溶液

本发明的另一主要目的在于提供一种猪传染性胸膜肺炎三价灭活疫苗，含有的佐剂为水性免疫佐剂。