[发明专利]一种提取纯化东廧宁的方法

说明书

技术领域：

本发明属于植物有效成分提取分离领域，具体涉及一种提取纯化东廧宁的方法。

背景技术：

东廧宁(Nazlinin)为白色无定型粉末，是一种吲哚生物碱，分子式为C₁₅H₂₁N₃，分子量为243.35，来源于蒺藜科(Zygophyllaceae)东廧Nitraria schoberi L.地上部分。药理研究表明，东廧宁对血管有收缩和松弛作用，用兔子带有内皮的主动脉环试验，浓度在40nmol以下时，有血管松弛活性；当剂量超过40nmol时，松弛活性就转变成收缩活性，除去内皮，松弛活性消失。

东廧，又名小果白刺、西伯利亚白刺(治沙研究)、酸胖(甘肃河西)、卡密(甘肃民勤)、白刺(中国经济植物志)，主要分布于我国各沙漠地区，华北及东北沿海沙区也有分布，生于湖盆边缘沙地、盐渍化沙地、沿海盐化沙地，分布范围较广，因生态条件悬殊，植物形态变幅也大。其叶和果实均可入药，果实在新疆少数民族地区维吾尔、哈萨克民间主要用于治疗消化不良、月经不调和高血压头晕等疾病，疗效确切可靠。近年来的实验还显示白刺果有一定的抗脂质过氧化作用和提高SOD酶活力的作用，因而具有延缓衰老的保健功能。

目前对白刺属植物化学成分研究较少，李方群等采用95％乙醇提取3次，每次2h，得率较低，所得白刺总生物碱含量较低。

发明内容：

本发明要解决的技术问题是提供一种提取纯化东廧宁的方法，该方法工艺简单、污染小、得率高、产品纯度高。

为了解决上述技术问题，本发明的技术方案如下：

一种提取纯化东廧宁的方法，其特征在于包括以下步骤：以东廧为原料，投入萃取釜中，采用超临界CO₂萃取2-4小时，收集萃取物，用氨水调节pH至8-10，加入氯仿萃取，氯仿萃取液加入氧化铝中压柱，水洗至中性，再用二氯甲烷-甲醇混合溶液洗脱，TLC跟踪检测，收集高浓度流分，回收试剂，干燥得东廧宁粗品，再用半制备高效液相分离得到东廧宁产品。

所述超临界CO₂萃取条件为：萃取温度为35-43℃，萃取压力为16-22MPa，分离釜I温度为50-60℃，压力为7-10MPa，分离釜II温度为45-55℃，压力为4-6MPa。

所述氧化铝为中性氧化铝，目数为100-300目。

所述二氯甲烷-甲醇梯度洗脱顺序为：依次按体积比二氯甲烷-甲醇20∶1、10∶1、5∶1、7∶3进行洗脱。

所述半制备型高效液相色谱色谱条件为：流动相为甲醇-乙腈-三乙胺(35∶65∶0.1)，流速20-50ml/min。

本发明的有益效果在于：采用超临界CO₂萃取，具有操作温度低，选择性好，操作条件较温和，制取的产品纯度高，萃取无残留，是一种高效环保的萃取方法；采用半制备型高效液相色谱精制纯化，纯度高达98％以上，同时可进行大量制备；本发明工艺稳定，可用于工业化生产。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

将东廧地上部分粉碎，过20目筛，称取10kg加入萃取釜中，开启机器，调节参数：萃取釜温度为37℃，萃取釜压力为20MPa，分离釜I温度为58℃，压力为8MPa，分离釜II温度为55℃，压力为5MPa，以18kg/L的流速通入CO₂萃取2小时，解析萃取物，用氨水调节pH至8.5，再加入氯仿萃取多次，收集合并氯仿萃取液，减压浓缩后加入氧化铝中压柱(200-300目的中性氧化铝，柱径高比为1∶7)，依次按体积比二氯甲烷-甲醇20∶1、10∶1、5∶1、7∶3进行洗脱，TLC跟踪检测，收集高浓度流分，回收试剂，干燥得东廧宁粗品，将东廧宁粗品用甲醇溶解，微孔滤膜过滤，经半制备型高效液相色谱分离，色谱柱：C₁₈，流动相为甲醇-乙腈-三乙胺(35∶65∶0.1)，流速30ml/min，以紫外检测器检测指导产品收集，连续进样，收集东廧宁高纯度流分，浓缩干燥得产品146mg，含量为98.3％。

实施例2：