[发明专利]甘五酸在制备防治肝炎病毒药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种化合物的用途，具体地说，是甘五酸在制备防治肝炎病毒药物中的应用。

背景技术

甘五酸的化学结构如下：

。

甘五酸（schizandronic acid, ganwuweizic acid）是华中五味子( Schisandra sphenanthera Rehd.et. )和北五味子（Schisandra chinensis）等果实中分离得到的四环三萜类化合物（详见：都姣娇，穆淑珍。华中五味子化学成分研究，首都医药，2011；18（18）：52-54；Li, L. N. and Xue, H., Planta Med., 1986；52，492－493；王丽薇，周长新，Bernd，等。北五味子化学成分研究，中国现代应用药学2006；23（5）：363-365）。

中国专利公开号CN1327859C公开了一种五味子提取物和制备方法及其用途，涉及一种含至少50%总木脂素的五味子提取物，其制备方法，以及该提取物在制备治疗肝炎、神经衰弱、抗衰老等药物中的应用。中国专利公开号CN101057887A公开了一种北五味子藤茎或藤茎皮提取物及其制备方法，以及该提取物在制备治疗神经衰弱、胃肠炎或溃疡、肝炎，或抗衰老等药物中的应用，其特征在于，该提取物至少含30%五味子藤茎总木脂素。但是关于华中五味子和北五味子等果实中分离得到的四环三萜类化合物甘五酸具有抗乙型肝炎和丙型肝炎的病毒作用目前还未见报道。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供甘五酸在制备防治肝炎病毒药物中的应用。

本发明的再一的目的是，提供甘五酸在制备保肝的食品和保健品中的应用。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：甘五酸在制备防治肝炎病毒药物中的应用，所述的甘五酸为四环三萜类化合物，化学结构式如下：

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所述的甘五酸在制备抗乙型肝炎病毒药物中的应用。

所述的甘五酸在制备抗丙型肝炎病毒药物中的应用。

为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：甘五酸在制备保肝的食品和保健品中的应用。

本发明优点在于：

本发明为四环三萜类化合物甘五酸提供一种制备抗乙型肝炎病毒（HBV）和丙型肝炎病毒（HCV）药物的用途，试验结果发现，该化合物具有显著的抗HBV和抗HCV活性，尤其能抑制HCV入侵靶细胞，可用于制备抗乙肝病毒和抗丙肝病毒的药物。本发明为寻找抗乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒药物提供了新的来源。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明提供的具体实施方式作详细说明。

实施例1  甘五酸抗乙肝病毒试验：

一、实验药物、试剂及材料

1. 化合物：甘五酸。

2. 立可读HBsAg诊断试剂盒（上海科华生物技术有限公司）。

3. 立可读HBeAg诊断试剂盒（上海科华生物技术有限公司）。

4. 细胞培养液，配制，其含10%胎牛血清，0.03%谷氨酰胺，G418 390μg/ml，卡那霉素50U/ml，调pH至7.2。

5. 细胞消化液，配制，其含0.25%胰蛋白酶，用磷酸缓冲液配制。

6. 细胞系HepG 2.2.15，为 HBV-DNA克隆转染人肝癌细胞的2.2.15细胞系。

二、实验方法：按试剂盒的说明书操作

取处于对数生长期的HepG 2.2.15细胞，调整细胞浓度为2×10⁵个/ml，取100μl种96孔板；药物不同浓度稀释培养24小时后加药，8天后取上清测表面抗原（HBsAg）和核心抗原（HBeAg）。

（1）每孔加入待测标本50μl，设阴、阳性对照各2孔，每孔加入阴性对照（或阳性对照）各一滴，并设空白对照一孔；

（2）每孔加入酶结合物1滴（空白对照孔除外），充分混匀，封板，置37 C孵育30分钟；

（3）弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置5秒，甩干，重复五次后拍干；

（4）每孔加显色剂A液、B液各1滴，充分混匀，封板，置37 C孵育15分钟；

（5）每孔加入终止液1滴，混匀；

（6）用酶标仪读数，取波长450nm，参考波长630nm，读取各孔读数。

三、实验结果

结果见表1、表2。

表1 甘五酸对乙肝核心抗原（HBsAg）抑制活性(%)