[发明专利]一株H1N1亚型猪流感病毒及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一株H1N1亚型猪流感病毒及其应用。 

背景技术

猪流感(Swine influenza，SI)是由A型流感病毒引起的一种急性、传染性猪的呼吸道疾病，其通过不断抗原漂移或抗原转变实现进化，导致亚型众多，难以根除。目前猪流感病毒已有H1N1、H1N2、H3N2、H1N7、H2N3、H3N1、H3N3、H3N6、H4N6、H5N1、H9N2等11种血清亚型，其中在猪群中广泛流行的主要有古典猪H1N1、类禽H1N2和类人H3N2亚型。同时猪流感是一种免疫抑制性疾病，经常导致猪群并发或继发其他病毒或细菌的感染，使疫情更为复杂，死亡率增高，给畜牧业造成巨大的经济损失。 

猪体内同时具有唾液酸α-2，3半乳糖(SAα-2，3-Gal)和唾液酸α-2，6半乳糖(SAα-2，6-Gal)，所以具有同时感染禽、马和人流感病毒的能力，被认为是导致新型流感毒株产生的重要中间宿主，被称为“基因混合器”，是造成流感大流行的重要潜在危险因素。2009年3月起始于美国和墨西哥的H1N1亚型流感疫情，再次证实了猪流感在兽医和人类公共卫生学中的重要地位。研制安全有效的猪流感疫苗是控制猪流感疫情、减少人类流感隐患和保证畜牧业健康发展的重要保障，而选取合适的猪流感病毒株则为研制安全、有效的猪流感疫苗的首要条件。 

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供一株H1N1亚型猪流感病毒及其 应用。 

为实现上述发明目的，本发明首先提供一株H1N1亚型猪流感病毒A/Swine/Shanxi/D5/2011(H1N1)(Swine influenza virus)，其保藏号为CGMCC No.5323。 

本发明还提供含有治疗有效量的A/Swine/Shanxi/D5/2011(H1N1)的疫苗。其中，所述的A/Swine/Shanxi/D5/2011(H1N1)优选为灭活的病毒。 

在本发明优选的实施方案中，所述疫苗还可含有药学可接受的佐剂。 

其中，所述的佐剂可为本领域公知的任何适合制备疫苗的佐剂，优选为以下任何一类佐剂中的一种或几种： 

1)无机佐剂：如白油、铝佐剂、Montanide^TM ISA 206 VG(简称206)佐剂、Montanide^TM ISA 70M VG(简称70M)佐剂、Montanide^TM ISA70essai Mi(i＝1-8)[简称70Mi(i＝1-8)]佐剂等； 

2)表面活性剂佐剂：如MF59、ISCOM^TM、ISCOMA-TRIX^TM等； 

3)内源性及生物源性佐剂，如蜂胶、ODN、QS21、SAF、CAMPs、HgM-CSF、IL-12、IL-2、大肠杆菌不耐热肠毒素、多糖类物质等。 

在本发明另一优选的实施方案中，本发明的疫苗可为油乳剂疫苗、铝胶疫苗、蜂胶疫苗。 

进一步，本发明还提供A/Swine/Shanxi/D5/2011(H1N1)在制备治疗猪流感药物中的应用。 

本发明的H1N1亚型猪流感病毒无外源病原污染，在鸡胚和细胞上均具有较高的增殖能力，攻毒BALB/c小鼠和猪流感阴性仔猪后可观察到明显的临床症状，剖检病变典型，而且该H1N1亚型猪流感病毒免疫原性良好，以其制备的油乳剂灭活疫苗免疫猪后对同源病毒攻击的保护效率达100％，为一株良好的猪流感疫苗候选毒株。 

本发明的病毒株分离自疑似流感病猪的肺病料，证实分离出的病毒具有血凝活性，RT-PCR证实具有流感HA基因片段，与H1亚型猪流感病毒单因子阳性血清的HI试验为阳性，初步鉴定为H1亚型，且电镜观察具有流感病毒粒子形态特征。将该病毒株命名为流感病毒A/Swine/Shanxi/D5/2011(H1N1)，并于2011年10月12日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院，中国科学院微生物研究所)，简称CGMCC，保藏登记号为：CGMCC No.5323。 

附图说明

图1为H1N1亚型猪流感病毒A/Swine/Shanxi/D5/2011(H1N1)电镜照片。 

图2为正常的MDCK细胞电镜照片。