[发明专利]一种胃蛋白酶法大分子胶原蛋白热变性程度的评价方法无效
申请号: | 201210009684.2 | 申请日: | 2012-01-13 |
公开(公告)号: | CN102621213A | 公开(公告)日: | 2012-08-01 |
发明(设计)人: | 张俊杰;段蕊;秦松 | 申请(专利权)人: | 淮海工学院;中国科学院烟台海岸带研究所 |
主分类号: | G01N27/447 | 分类号: | G01N27/447;G01N1/44 |
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地址: | 222000 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 胃蛋白酶 大分子 胶原 蛋白 变性 程度 评价 方法 | ||
1.一种胃蛋白酶法大分子胶原蛋白热变性程度的评价方法,其特征在于,步骤如下:
(1)原料选择,选择水产品加工的下脚料-鱼皮为原料,也可以选择其他富含胶原蛋白的动物组织如猪皮、牛皮、筋腱。
(2)浸泡溶解:在步骤(1)中原料加入0.01-1.0mol/L醋酸,获得胶原蛋白溶液,胶原蛋白溶液的浓度为0.1-20%。
(3)加热预处理:将步骤(2)中获得的胶原蛋白溶液加热,加热时间为10-200分钟,加热温度为20℃-80℃,加热过程中,每隔5分钟晃动一次,加热完成后迅速降温冷却。
(4)酶解:在步骤(3)中获得的胶原蛋白液中加入胃蛋白酶,加入量为:1-20%,反应温度10-60℃,时间10-100分钟,反应完成后加入苯甲基磺酰氟终止反应。
(5)制作电泳样品并电泳:将终止反应的胶原蛋白溶液加入十二烷基磺酸钠溶液制作电泳样品并电泳。
2.根据权利要求1所述的胃蛋白酶法大分子胶原蛋白热变性程度的评价方法,其特征在于:步骤(2)中加入的醋酸浓度为0.04-0.8mol/L,胶原蛋白溶液的浓度为5-15%。
3.根据权利要求1所述的胃蛋白酶法大分子胶原蛋白热变性程度的评价方法,其特征在于:步骤(3)中加热时间为20-180分钟,加热温度为20℃-80℃。
4.根据权利要求1所述的胃蛋白酶法大分子胶原蛋白热变性程度的评价方法,其特征在于:步骤(4)中,酶解时加入胃蛋白酶的量为5-15%。
5.根据权利要求1所述的胃蛋白酶法大分子胶原蛋白热变性程度的评价方法,其特征在于:步骤(4)中,加热温度为15-55℃,加热时间为20-50分钟。
6.根据权利要求1所述的胃蛋白酶法大分子胶原蛋白热变性程度的评价方法,其特征在于:步骤(5)中通过胶原蛋白β链的变化来判断胶原蛋白的变性程度。
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