[发明专利]用于检测血管紧张素II的磁微粒化学发光试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及医用诊断试剂领域，尤其是涉及一种利用化学发光技术结合磁微粒偶联和分离技术检测血管紧张素II含量的试剂盒。

背景技术

血管紧张素是一种能够收缩血管升高血压的多肽，它是肾素-血管紧张素-醛固酮系统的一部分。许多降血压药物以血管紧张素为靶分子。血管紧张素也能够刺激肾上腺皮质分泌醛固酮。醛固酮促进远端肾单位的钠潴留，同时也能够升高血压。

血管紧张素II是肾素-血管紧张素-醛固酮系统调节血压的一个直接作用物质。同时，血管紧张素II也能够作为促生长因子直接促进血管内皮细胞的增生。最近的研究发现，血管紧张素II直接和血管内皮细胞增生，血管狭窄和动脉血管阻力增加有直接关系。因此，血管紧张素II用于高血压的诊断和治疗效果的检测被越来越重视。

摄取ACEI后，活性肾素和ANG1的水平会立即升高，同时伴有血浆血管紧张素II水平的降低。因此，短期内血浆血管紧张素II的水平体现了RAS系统对ACEI的一个调整和适应过程。长期ACEI的治疗通常会伴有血浆血管紧张素II水平的反弹。这可能主要是由于血管紧张素II的其他合成途径的代偿升高。血管紧张素II的水平反弹提示，在高血压的长期治疗过程中，要对血管紧张素II的水平进行连续和不间断的监测。

血管紧张素II的检测是一个非常有帮助的工具，能够监测药物的作用和效果，评价疗效。同时对于充血性心力衰竭和高血压的治疗可以起到很好的评价和指导作用。

目前检测血管紧张素II的方法以放射免疫技术为主，采用放射免疫技术测定血管紧张素II，其灵敏度和抗干扰能力严重不足，由于在测定血管紧张素II方面操作方法的复杂性，操作过程不易控制，造成测定结果的重复性差、变异大，另外放射免疫方法存在检测时间长、稳定性差的缺陷，同时还存在放射源污染的问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种快速准确且污染小的用于检测血管紧张素II的磁微粒化学发光试剂盒。

为实现上述目的，本发明可采取下述技术方案：

本发明所述的用于检测血管紧张素II的磁微粒化学发光试剂盒，包括偶联有兔抗血管紧张素II抗体的磁微粒混悬液，校准品，生物素偶联的血管紧张素II抗原，辣根过氧化物酶标记链霉亲和素，化学发光底物A、化学发光底物B以及洗液。

    所述偶联有兔抗血管紧张素II抗体的磁微粒先包被羊抗兔IgG，再间接包被兔抗血管紧张素II抗体。

所述校准品以0.05M的Tris-NaCl和2%的酪蛋白组成pH7.4的缓冲液为基质，加入血管紧张素II纯品配制而成。

所述生物素偶联的血管紧张素II抗原以0.01M的PBS和2%BSA作为缓冲液基质，工作浓度为1:10000。

所述辣根过氧化物酶标记链霉亲和素以0.01M的PBS和2%BSA作为缓冲液基质，工作浓度为1:6000。

所述化学发光底物A由Luminol 0.15mM、羟基香豆素0.59 mM、没食子酸0.35 mM、Tris-HCl缓冲液0.2M组成，最后调pH7.4；化学发光底物B 由0.2M乙酸-乙酸盐缓冲液、维生素C 0.12 mM、氨基酸氧化酶0.85 mM组成，最后调pH7.4。

本发明的优点在于可实现操作的简便性、自动化性，检测结果具有更好的重复性和准确性，检测时间短，稳定性可达12个月，不存在放射污染。

附图说明

图1是本发明试剂盒检测血管紧张素II的校准曲线图。

具体实施方式

本发明所述的用于检测血管紧张素II的磁微粒化学发光试剂盒，包括偶联有兔抗血管紧张素II抗体的磁微粒混悬液，校准品，生物素偶联的血管紧张素II抗原，辣根过氧化物酶标记链霉亲和素，化学发光底物A、化学发光底物B以及洗液。

    偶联有兔抗血管紧张素II抗体的磁微粒上先偶联羊抗兔IgG，再间接免疫偶联兔抗血管紧张素II抗体，采用氨基戊二醛法；校准品以0.05M的Tris-NaCl和2%的酪蛋白组成pH7.4的缓冲液为基质加入血管紧张素II纯品配制而成；生物素偶联的血管紧张素II抗原以0.01M的PBS和2%BSA作为缓冲液基质稀释到1:10000的工作浓度；辣根过氧化物酶标记链霉亲和素以0.01M的PBS和2%BSA为缓冲液基质稀释至1:6000的工作浓度；