[发明专利]培育抗病水稻的方法及其专用载体和启动子有效
| 申请号: | 201210004213.2 | 申请日: | 2012-01-09 |
| 公开(公告)号: | CN103194484A | 公开(公告)日: | 2013-07-10 |
| 发明(设计)人: | 方荣祥;贾燕涛;陈晓英;郭萍 | 申请(专利权)人: | 中国科学院微生物研究所 |
| 主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12N15/113;A01H5/00 |
| 代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
| 地址: | 100101*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 培育 抗病 水稻 方法 及其 专用 载体 启动子 | ||
1.一种培育抗病转基因植物的方法,为将microRNA393的编码基因及驱动其表达的诱导型启动子导入目的植物,获得转基因植物;所述转基因植物的抗病性高于所述目的植物。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述诱导型启动子为如下1)或2):
1)由单顺式调控元件和CaMV35S启动子组成;
2)由双顺式调控元件和CaMV35S启动子组成;
所述microRNA393的核苷酸序列为序列表中的序列3;
所述单顺式调控元件的核苷酸序列为序列1的自5’末端第1-66位核苷酸;
所述双顺式调控元件的核苷酸序列为序列2的自5’末端第1-114位核苷酸;
所述CaMV35S启动子的核苷酸序列为序列1的自5’末端第67-178位核苷酸或序列表中序列2自5’末端第115-226位核苷酸;
所述microRNA393的编码基因的核苷酸序列为序列表中的序列1自5’末端第179-316位核苷酸或序列表中的序列2自5’末端第227-364位核苷酸。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:
所述microRNA393的编码基因及驱动其表达的诱导型启动子通过植物表达载体导入所述目的植物;
所述植物表达载体为如下a)或b):
a)为将序列表中的序列1插入1300-DAS的中,得到表达microRNA393的载体;
b)为将序列表中的序列2插入1300-DAS的中,得到表达microRNA393的载体。
4.根据权利要求1-3中任一所述的方法,其特征在于:
所述目的植物为双子叶植物或者单子叶植物,所述单子叶植物具体为水稻。
5.根据权利要求1-4任一所述的方法,其特征在于:所述转基因植物的抗病性高于所述目的植物是在引发所述病的病原菌诱导下产生的;
所述病具体为水稻白叶枯病,所述水稻白叶枯病的病原菌具体为水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae)。
6.一种重组载体,为如下a)或b):
a)为将序列表中的序列1插入1300-DAS的中,得到表达microRNA393的载体;
b)为将序列表中的序列2插入1300-DAS的中,得到表达microRNA393的载体。
7.一种DNA分子A,为如下1)-4)中的任一一种:
1)序列表的序列1自5’末端第1-66位核苷酸所示的DNA分子;
2)序列表的序列2自5’末端第1-114位核苷酸所示的DNA分子;
3)在严格条件下与1)或2)所述DNA序列杂交且具有同样功能的DNA分子;
4)与1)或2)中所述DNA序列具有90%以上同源性,且具有同样功能的DNA分子。
8.一种DNA分子B,为如下1)-4)中的任一一种:
1)序列表的序列1自5’末端第1-178位核苷酸所示的DNA分子;
2)序列表的序列2自5’末端第1-226位核苷酸所示的DNA分子;
3)在严格条件下与1)或2)所述DNA序列杂交且具有启动子功能的DNA分子;
4)与1)或2)中所述DNA序列具有90%以上同源性,且具有启动子功能的DNA分子。
9.权利要求7所述的DNA分子A或权利要求8所述的DNA分子B在启动目的基因在植物中表达的应用。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于:
所述目的基因为microRNA393或GUS;
所述microRNA393的编码基因的核苷酸序列为序列表中的序列1自5’末端第179-316位核苷酸或序列表中的序列2自5’末端第227-364位核苷酸。
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