[发明专利]一种大蒜花序轴离体培养直接诱导鳞茎培养基

说明书

技术领域

本发明涉及大蒜组织培养技术领域。尤其涉及一种大蒜花序轴离体培养直接诱导鳞茎培养基。

背景技术

大蒜(Allium sativum L)为百合科葱属，是无性繁殖植物，由于连年进行无性繁殖，致使病毒大量积累，大蒜感染病毒病主要表现为蒜头逐年变小、产量低、品质差，一般减产达到30％～50％，严重制约了大蒜产业发展。应用茎尖离体培养进行大蒜脱毒种苗的培育已有大量研究，脱毒种苗的繁育多是以试管苗作为与大田增殖的接口，驯化困难，成活率低，对季节的依赖性大，已成为制约大蒜脱毒种苗进入生产实际应用的关键因素。大蒜鳞茎是一种具有较强环境适应能力的繁殖材料。经研究发现，大蒜试管苗经诱导形成试管鳞茎后，再将小鳞茎栽植到大田中，能显著提高移栽成活率。此外，试管鳞茎还具有易贮存、播种、运输方便等优点，因此，试管鳞茎的形成日益受到重视。但目前大蒜组培中定向培养试管鳞茎的系统研究尚少。

发明内容

本发明的目的是为了解决大蒜试管苗驯化困难、移栽成活率低，且难以与大田生长季节衔接制约问题，提供了一种大蒜花序轴离体培养直接诱导鳞茎培养基，具体技术方案如下：

本发明的一种大蒜花序轴离体培养直接诱导鳞茎培养基，每升培养基中按重量由1/2MS8921.73mg、90000mg蔗糖和余量为蒸馏水合成，该培养基的PH值为5.8～6.0；

所述的1/2MS的成分按重量由硝酸钾950mg、硝酸铵825mg、硫酸镁185mg、氯化钙220mg、磷酸二氢钾85mg、肌醇50mg、硼酸6.2mg、硫酸锰22.3mg、碘化钾0.83mg、硫酸锌8.6mg、钼酸钠0.25mg、甘氨酸2.0mg、硫酸铜0.025mg、氯化钴0.025mg、盐酸硫胺素0.4mg、盐酸吡哆素0.5mg、烟酸0.5mg、硫酸亚铁27.8mg、乙二胺四乙酸二钠37.3mg和琼脂粉6500mg组成。

大蒜蒜薹上可形成许多气生鳞茎，表明花序轴顶端分生组织具有很强的腋芽萌发潜力。本发明以大蒜花序轴为外植体进行组织培养，不经试管苗的诱导阶段，直接诱导试管鳞茎的产生，筛选出大蒜花序轴离体培养直接诱导鳞茎的高效培养基，为加快大蒜脱毒种蒜的繁育进程提供技术保障。

本发明的一种大蒜花序轴离体培养直接诱导鳞茎培养基，是在大量实验的基础上从调整植物激素、蔗糖浓度入手，筛选出的大蒜花序轴离体培养直接诱导鳞茎培养基，该培养基试管鳞茎的诱导效率较高，鳞茎的诱导率为96.8％，鳞茎总诱导率为800％，便于大规模试管鳞茎的生产，同时大蒜试管苗的移栽、驯化难题将从根本上得到解决的优点。

具体实施方式

具体实施方式一、本实施方式每升培养基中按重量由1/2MS8921.73mg、90000mg蔗糖和余量为蒸馏水合成，该培养基的PH值为5.8～6.0；

所述的1/2MS的成分按重量由硝酸钾950mg、硝酸铵825mg、硫酸镁185mg、氯化钙220mg、磷酸二氢钾85mg、肌醇50mg、硼酸6.2mg、硫酸锰22.3mg、碘化钾0.83mg、硫酸锌8.6mg、钼酸钠0.25mg、甘氨酸2.0mg、硫酸铜0.025mg、氯化钴0.025mg、盐酸硫胺素0.4mg、盐酸吡哆素0.5mg、烟酸0.5mg、硫酸亚铁27.8mg、乙二胺四乙酸二钠37.3mg和琼脂粉6500mg组成。

具体实施方式二、本实施方式采用下列试验材料和方法：田间采集黑龙江省绥陵大蒜的蒜薹，蒜薹经表面消毒后，在超净台上剥取花序轴接种到诱导培养基上，然后放在25～28℃，光照强度为2000LX，光照时间为12小时/每天，15天后统计鳞茎的诱导率(诱导出鳞茎的花序轴数/接种的花序轴数×100％)、鳞茎的总诱导率(诱导出鳞茎的总数/接种的花序轴总数×100％)。

诱导培养基以1/2MS培养基成分为基础，PH值为5.8～6.0，通过调整添加植物激素6-BA(0～2.0)mg/L、NAA(0～0.1)mg/L和30000～90000mg/L蔗糖浓度，共设9组处理。

本实验结果如下表1所示：

表1：SH₁～SH₉培养基的试管鳞茎诱导率及鳞茎总诱导率

试验结果表明：在SH₁～SH₉9组处理中，SH₁培养基试管鳞茎的诱导率、鳞茎总诱导率最高，分别为96.8％、800％。因此，SH₁培养基为大蒜花序轴离体培养直接诱导鳞茎最佳培养基。