[发明专利]一种具有抗HIV-1病毒的结核基因疫苗及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种具有抗HIV-1病毒的结核基因疫苗，由一个载体构成，在所述的载体中插入有一段外源目的基因，其特征在于：所述的外源目的基因包括一个人类免疫缺陷病毒HIV-1NL4-3株来源的衣壳蛋白p24的全长基因，在所述的人类免疫缺陷病毒HIV-1NL4-3株来源的衣壳蛋白p24的全长基因中嵌合有来自结核杆菌抗原的4个T细胞表位多肽基因，所述的4个T细胞表位分别是结核分枝杆菌H37Rv株来源的MPT64蛋白的76～84位基因，结核分枝杆菌H37Rv株来源的Ag85A蛋白的242～250位基因，结核分枝杆菌H37Rv株来源的Ag85B蛋白的184～192位基因，结核分枝杆菌H37Rv株来源的TB10.4蛋白的74～82位基因，从人类免疫缺陷病毒HIV-1NL4-3株来源的衣壳蛋白p24全长基因的5’开始，在第1位碱基前插入结核分枝杆菌H37Rv株来源的MPT64蛋白的76～84位基因，在第273位碱基后插入结核分枝杆菌H37Rv株来源的Ag85A蛋白的242～250位基因，在第303位碱基后插入结核分枝杆菌H37Rv株来源的Ag85B蛋白的184～192位基因，在第441位碱基后插入结核分枝杆菌H37Rv株来源的TB10.4蛋白的74～82位基因，所述的人类免疫缺陷病毒HIV-1NL4-3株来源的衣壳蛋白p24全长基因的DNA序列如SEQ IDNO：2所示，所述的结核分枝杆菌H37Rv株来源的MPT64蛋白的76～84位基因的DNA序列如SEQ ID NO：4所示，所述的结核分枝杆菌H37Rv株来源的Ag85A蛋白的242～250位基因的DNA序列如SEQ ID NO：6所示，所述的结核分枝杆菌H37Rv株来源的Ag85B蛋白的184～192位基因的DNA序列如SEQ ID NO：8所示，所述的结核分枝杆菌H37Rv株来源的TB10.4蛋白的74～82位基因的DNA序列如SEQ ID NO：10所示。

2.根据权利要求1所述的一种具有抗HIV-1病毒的结核基因疫苗，其特征在于：嵌合了结核分枝杆菌H37Rv株来源的4个T细胞表位基因的人类免疫缺陷病毒HIV-1NL4-3株来源的衣壳蛋白p24全长基因所构成的外源目的基因的DNA序列如SEQ ID NO：12所示。

3.根据权利要求1所述的具有抗HIV-1病毒的结核基因疫苗，其特征在于：所述的载体为真核表达质粒，所述的真核表达质粒选自pcDNA3.1质粒或pVAX1质粒中的任意一种。

4.根据权利要求1所述的具有抗HIV-1病毒的结核基因疫苗，其特征在于：所述的人类免疫缺陷病毒HIV-1NL4-3株来源的衣壳蛋白p24的氨基酸序列SEQ ID如NO：1所示。

5.根据权利要求1所述的具有抗HIV-1病毒的结核基因疫苗，其特征在于：所述的结核分枝杆菌H37Rv株来源的MPT64蛋白的76～84位基因的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示。

6.根据权利要求1所述的具有抗HIV-1病毒的结核基因疫苗，其特征在于：所述的结核分枝杆菌H37Rv株来源的Ag85A蛋白的242～250位基因的氨基酸序列如SEQ ID NO：5所示。

7.根据权利要求1所述的具有抗HIV-1病毒的结核基因疫苗，其特征在于：所述的结核分枝杆菌H37Rv株来源的Ag85B蛋白的184～192位基因的氨基酸序列如SEQ ID NO：7所示。

8.根据权利要求1所述的具有抗HIV-1病毒的结核基因疫苗，其特征在于：所述的结核分枝杆菌H37Rv株来源的TB10.4蛋白的74～82位基因的氨基酸序列如SEQ ID NO：9所示。

9.根据权利要求1所述的具有抗HIV-1病毒的结核基因疫苗，其特征在于：嵌合了结核分枝杆菌H37Rv株来源的4个T细胞表位基因的人类免疫缺陷病毒HIV-1株来源的衣壳蛋白p24的全长基因所构成的外源目的基因蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：11所示。