[发明专利]基质金属蛋白酶活性抑制肽及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及用于抑制基质金属蛋白酶的活性的肽及其用途。

背景技术

基质金属蛋白酶(MMP，Matrix metalloproteinase)作为可使胶原蛋白(collagen)、蛋白聚糖(proteoglycan)及明胶(gelatin)等巨大生物分子分解的肽链内切酶(endopeptidase)，大致分类为胶原酶(colla genase)、明胶酶(gelatinase)、溶基质蛋白酶(stromelysin)及膜型基质金属蛋白酶(MT-MMP，membrane-type matrix metalloproteinase)。基质金属蛋白酶在均以酶原(proenzyme)的形态表达之后，其一部分被切割，来进行活性化(Bond,J.S.,et al.,Int.J.Biochem.,75,565-574(1985)；Chen,J.M.,Chen,W.T.,Cell,48,193～203(1987)；Harri s,E.D.et al.,Coll Rel Res,4,493-512(1984))。

胶原酶作用于三股螺旋型间质胶原和明胶等，已知有3个类型，即成纤维细胞胶原酶、中性粒细胞胶原酶及胶原酶-3，据报告，切割第I型、第II型及第III型的胶原纤维(Collagen fibrils)(Goldberg,G.I.,et al,J.Biol.Chem.,261,6600-6605(1986)；Fini,M.E.,et al.,Bioch emistry,26,6155-6165(1987))。并且，已知这三种胶原酶具有相互约50％以上的序列一致性(Borkakoti,et al.,Nature Struct.Biol.,1,106-110(1994)；EMBO,J.,13,1263-1269(1994))。

基质金属蛋白酶区分为三个部位，即前肽部位、催化性部位及C-末端部位。基质金属蛋白酶在均以没有活性的潜伏型生成而被分泌之后，N-末端的前肽部位的80个氨基酸被切割，且具有PRCGVPD序列的部位的半胱氨酸被去除并进行活性化(Van Wart,H.E.et al.,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,87,5578-5582(1990))。已知活性化的基质金属蛋白酶与作为天然抑制剂的基质金属蛋白酶组织抑制剂(Tissue Inh ibitor of Matrix Metalloproteinase)相结合来抑制活性，而这种结合通过催化性部位来调节(Murphy,et al.,J.Niol.Chem.,267,9612-9618(1992))。多种形态的基质金属蛋白酶具有基质特异性，在正常的细胞中，有必要分解细胞外基质(extracellular matrix)或其他胶原蛋白结构时，在代谢过程中被表达。基质金属蛋白酶介导的疾病有动脉硬化症、中枢神经系统炎症疾病、阿尔茨海默病、皮肤老化、类风湿性关节炎、骨关节炎、角膜溃疡、骨疾病、蛋白尿症、腹主动脉瘤、外伤性关节损伤引起的退行性软骨损失、神经系统脱髓鞘疾病、肝硬变、肾小球疾病、胚胎膜未成熟破裂、炎症性肠病、齿根膜疾病、老化相关黄斑变性、糖尿病性视网膜病变、增生性玻璃体视网膜病变、未成熟性视网膜病变、圆锥角膜、干燥综合征、近视、眼肿瘤、角膜移植排斥、血管新生、癌的浸润和转移等。类风湿性关节炎和骨关节炎的原因是自身免疫异常，但随着病的进展，关节软骨的细胞外基质被破坏。已知，在这种关节炎及关节外伤中，溶基质蛋白酶被识别为主要的酶，且在将原胶原酶转化为活性胶原酶方面起到重要的作用。因此，可通过抑制基质金属蛋白酶活性来阻止关节炎的进行，据报告，上述基质金属蛋白酶来源于渗透性白细胞或成纤维细胞或外来的微生物。

并且，通过炎症介质的刺激来分泌的胶原酶及从细菌分泌的胶原酶分解作为牙周组织的基质的胶原蛋白，从而发生牙龈退缩，并逐渐进行而引起牙周疾病。确认了从引起炎症的牙龈分离的成纤维细胞胶原酶及溶基质蛋白酶的活性，并确认了酶的水平与观察到的牙龈炎的程度相互关联(Overall,C.M.et al.,J.Periodontal Res.22,81-88(1987))。