[发明专利]具有相反电荷且其中一种具有剩余电荷的两种聚氨基酸的纳米颗粒的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于从相反极性的两种聚电解质的特定混合物制备纳米颗粒的新方法，聚电解质适当地结合活性成分。

背景技术

活性成分的制剂必须符合一定数量的耐受性标准、具有足够浓度的活性成分、同时具有低粘度以便可以容易地注射通过具有较小直径的针头，例如，27-规格至31-规格的针。

在该领域中，如文献WO2008/135561中所述，申请人的公司已经成功地开发了具有低粘度的稳定的悬浮液，该悬浮液由装载有活性成分的微粒构成。能够在较长时期内释放活性成分的这些微粒，在特定条件下尤其由相反极性的两种聚电解质聚合物（PE1）和（PE2）的混合物制成，这两种聚电解质中的至少一种聚电解质聚合物具有疏水基。该混合物产生尺寸在1μm和100μm之间的微粒。

然而，微粒的制剂不适合静脉给药，并且，在通过皮下注射给药的情况下，该制剂会产生不耐受的问题。

因此，从通过肠胃外给药活性成分的观点来看（尤其是静脉注射或皮下注射），优选地采用甚至更小尺寸的颗粒的悬浮液，且尤其是纳米尺度的微粒的悬浮液。

因此，仍然需要用于制备活性成分的纳米颗粒的稳定悬浮液的方法，其尤其适于肠胃外给药、尤其是静脉注射。

发明内容

具体地，本发明的目的在于提出可以获得这样的纳米颗粒的悬浮液的新方法。

意外地，发明人已经发现，在纳米颗粒适当地装载有活性成分的情况下，从特定聚电解质的特定的混合物可以获得纳米颗粒的流体制剂。

更确切地，根据第一方面，本发明涉及一种用于制备平均直径小于或等于500nm的纳米颗粒的方法，该方法至少包括下列步骤：

（1）制备包括携带疏水侧基的带电状态的第一聚电解质的纳米颗粒的水溶液；

（2）使所述溶液（1）和极性与所述第一聚电解质的极性相反的至少一种第二聚电解质一起相混合，其中阳离子聚电解质被加入到阴离子聚电解质的溶液中以形成带有过量负电荷的混合物；或者阴离子聚电解质被加入到阳离子聚电解质的溶液以形成带有过量正电荷的混合物；和

（3）由此形成纳米颗粒；

其中：

-所述阴离子聚电解质和阳离子聚电解质具有聚氨基酸直链骨架，不含有聚烷撑二醇侧基，且具有小于或等于2,000的聚合度；

-在两种聚电解质的混合物中的阳离子基团的数量与阴离子基团的数量的摩尔比Z在0.1和0.75之间或者在1.3和2之间；以及

-在所述混合物中的聚电解质的总质量浓度C严格小于2mg/g。

根据一个具体实施方式，本发明的方法包括，在步骤（3）之后，尤其是通过切向超滤或前置超滤、离心分离、蒸发或冻干而进行的一个或多个浓缩步骤（4）。

根据本发明的方法的实施方式变型，当Z在0.1和0.75之间，换句话说，当聚电解质的最终的混合物具有过量的负电荷时，步骤（1）包括制备阴离子聚电解质的纳米颗粒的水溶液。步骤（2）随后包括将尤其是水溶液形式的阳离子聚电解质添加到第一聚电解质的溶液（优选在温和搅拌的条件下放置）中。

相反地，当Z在1.3和2之间时，换句话说，当聚电解质的最终的混合物具有过量的正电荷时，步骤（1）包括制备阳离子聚电解质的纳米颗粒的水溶液。步骤（2）随后包括将尤其是水溶液形式的阴离子聚电解质添加到第一聚电解质的溶液（优选地在温和搅拌的条件下放置）中。

关于本发明的方法的步骤（2）的特征，本发明的方法对于防止形成不是根据本发明的颗粒（即，平均直径严格大于500nm的颗粒）是特别有利的。

根据一个特别有利的实施方式，步骤（1）的水溶液的纳米颗粒与活性成分非共价结合。

这样的活性成分的纳米颗粒的水溶液通过将活性成分添加到第一聚电解质的水性胶体溶液中而获得，所述活性成分与第一聚电解质的纳米颗粒非共价结合。

在本发明的方法的最后获得的纳米颗粒的制剂在多个方面证实是有利的。

首先，通过本发明的方法获得的纳米尺寸的颗粒尤其适用于通过静脉注射或皮下注射给药活性成分的制剂。至于用于治疗癌症的活性成分的肠胃外给药，本发明证实是特别有利的。

此外，本发明的方法中所用的聚电解质是生物相容性的。它们优选地是耐受性的且降解很快，即，在数天或数周的时间尺度上。

本发明的方法获得的结合活性成分的纳米颗粒对于运输活性成分（尤其是蛋白活性成分、肽活性成分）和/或溶解低分子量的活性成分是特别有利的。

具体地，这些纳米颗粒有利地能够在较长时期内释放活性成分。