[发明专利]用于促进皮肤细胞分化的物质的筛查方法

说明书

技术领域

本发明涉及用于促进皮肤细胞分化的物质的筛查方法及其试剂盒。

背景技术

表皮为皮肤的最外层，而角质层是表皮的最外层。当由角质形成细胞组成的角质层处于正常状态时，表皮才能充当身体的主要屏障，从而能够防御各种刺激并防止身体水分的发散。表皮形成细胞在皮肤最下层，即在基底层中进行增殖，然后通过棘层和颗粒层逐渐进行分化。通过这种角化过程，表皮形成细胞会产生天然保湿因子（NMFs）和脂质（神经酰胺、胆固醇或脂肪酸），进而形成角质层。通过这种角质层的正常形成，皮肤的屏障功能可以正常工作。

发明内容

技术问题

本发明在于提供用于促进皮肤细胞分化的物质的筛查方法及其试剂盒。进一步，本发明在于提供一种组合物，该组合物可以促进皮肤细胞的分化，滋润皮肤，增强皮肤屏障功能，或者降低或治疗特应性症状。

技术方案

在一方面，本发明提供用于促进皮肤细胞分化的物质的筛查方法，其包括：用测试物质处理皮肤细胞；以及核实在前一步骤中经测试物质处理过的皮肤细胞内的双氧化酶1（DUOX1）基因的相对表达水平。

在另一方面，本发明提供用于促进皮肤细胞分化的物质的筛查试剂盒，其包括可核实皮肤细胞内DUOX 1基因的相对表达水平的装置。

在又一方面，本发明提供用于促进皮肤细胞的分化、滋润皮肤、增强皮肤屏障功能或者降低或治疗特应新症状的组合物，该组合物包含作为活性成分的可增加DUOX1基因表达的物质。

有益效果

根据在此公开的用于促进皮肤细胞分化的物质的筛查方法，待用所述测试物质处理皮肤细胞后，该方法可通过检测DUOX1基因的相对表达水平来便捷且有效地核实用于促进皮肤细胞分化的物质。

附图说明

图1展示了根据正常人表皮角质形成细胞内钙浓度的DUOX1基因表达水平。

图2展示了当用DUOX1或DUOX2 siRNA处理皮肤表皮角质形成细胞时，与未用它们处理时相比，DUOX 1或DUOX 2的表达水平。

图3和图4展示了在用DUOX1或DUOX2 siRNA处理皮肤表皮角质形成细胞时，与未用它们处理时相比，纤聚蛋白（filaggrin）和兜甲蛋白（loricrin）（图3），以及角蛋白（keratin）1和角蛋白10（图4）的表达水平。

图5和图6展示了当用三百草或楝属（melia）的提取物处理皮肤表皮角质形成细胞时，与未用它们处理时相比，DUOX1和纤聚蛋白（图5），以及角蛋白1和角蛋白10（图6）的表达水平。

具体实施方式

双氧化酶也被称作Duox1或ThOX1（甲状腺氧化酶，Thyroid oxidase），是DUOX1基因编码而成的。它被首次发现于甲状腺中。人体内有两种同源物，即hDUOX 1和hDUOX 2， hDUOX1大量表达于气道上皮细胞内，而hDUOX2则大量表达于唾液腺和胃肠道中。DUOX1属于NADPH氧化酶（NOX），并且具有共7种同源物（Nox1、Nox2、Nox3、Nox4、Nox5、Duox1和Duox2）。其中，NOX在吞噬细胞的吞噬作用中作为产生活性氧簇（ROS）的蛋白质被人们做了大量研究，然而，最近在细胞组织内也发现了NOX并对其进行了研究，而不是在免疫细胞。已知，NOX/DUOX族将通过产生活性氧的生物作用参与高血压（NOX1）、免疫（NOX2/DUOX）、耳朵的形成（NOX）、甲状腺激素的产生（DUOX1和2）等当中。

构成皮肤屏障的最外层的角质层是由天然保湿因子、脂质等组成的。纤聚蛋白通过转录后修饰过程降解为多种亲水性氨基酸，而且已知由此形成的氨基酸池将构成天然保湿因子（NMFs），NMFs会帮助维持角质层的水分。进一步，亦知，纤聚蛋白基因的突变是重要的遗传危险因素，其通过减少皮肤保湿因子，破坏皮肤屏障功能，降低对过敏原或微生物的皮肤防御能力以及激活T细胞群来引发特应性湿疹，进而引发由自身免疫机制引起的慢性炎症。但是对其的治疗或预防方法还尚未出现。

下面，将详细地描述本发明。