[发明专利]具有内切葡聚糖酶活性的多肽及其编码多核苷酸

权利要求书

1.一种具有内切葡聚糖酶的分离的多肽，其选自下组：

(a)多肽，其与SEQ ID NO:2的成熟多肽具有至少90%，例如至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，至少99%，或100%序列同一性；

(b)多肽，其由多核苷酸编码，所述多核苷酸与SEQ ID NO:1的成熟多肽编码序列具有至少90%，例如至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，至少99%，或100%序列同一性；

(c)SEQ ID NO:2的成熟多肽的包含在一个或多个位置的取代、缺失和/或插入的变体，其中所述变体具有内切葡聚糖酶活性；和

(d)(a)、(b)或(c)的多肽的具有内切葡聚糖酶活性的片段。

2.权利要求1的多肽，其包含SEQ ID NO:2或其成熟多肽或由SEQ ID NO:2或其成熟多肽组成。

3.权利要求1或2的多肽，其由多核苷酸编码，所述多核苷酸包含于质粒pGEM-T-Ppin13，所述质粒包含于大肠杆菌DSM24144。

4.一种分离的多肽，其包含催化域，所述催化域选自下组：

(a)催化域，其与SEQ ID NO:2的氨基酸24至419具有至少91%，例如至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，至少99%，或100%的序列同一性；

(b)催化域，其由多核苷酸编码，所述多核苷酸与SEQ ID NO:1的核苷酸70至1257具有至少91%，例如至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，至少99%，或100%的序列同一性；

(c)SEQ ID NO:2的氨基酸24至419在一个或多个位置包含取代、缺失和/或插入的变体，其中所述变体具有内切葡聚糖酶活性；和

(d)(a)、(b)或(c)的催化域的片段，其具有内切葡聚糖酶活性。

5.一种分离的多肽，其包含纤维素结合域，所述纤维素结合域选自下组：

(a)纤维素结合域，其与SEQ ID NO:2的氨基酸463至498具有至少91%，例如至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，至少99%，或100%的序列同一性；

(b)纤维素结合域，其由多核苷酸编码，所述多核苷酸与SEQ ID NO:1的核苷酸1387至1494具有至少91%，例如至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，至少99%，或100%的序列同一性；

(c)SEQ ID NO:2的氨基酸463至498在一个或多个位置包含取代、缺失和/或插入的变体，其中所述变体具有纤维素结合活性；和

(d)(a)、(b)或(c)的纤维素结合域的片段，其具有纤维素结合活性。

6.一种分离的多核苷酸，其编码权利要求1-5任一项的多肽。

7.一种重组宿主细胞，其包含权利要求6的多核苷酸，所述多核苷酸可操作地连接于一个或多个调控序列，所述调控序列指导具有内切葡聚糖酶活性的多肽的产生。

8.一种产生权利要求1-5中任一项的多肽的方法，其包括：

(a)在有助于所述多肽产生的条件下培养细胞，所述细胞以其野生型形式产生所述多肽；和

(b)回收所述多肽。

9.一种产生具有内切葡聚糖酶活性的多肽的方法，其包括：

(a)在有助于所述多肽产生的条件下培养权利要求7的重组宿主细胞；和

(b)回收所述多肽。

10.一种转基因植物、植物部分或植物细胞，其用编码权利要求1-5中任一项的多肽的多核苷酸转化。

11.一种产生具有内切葡聚糖酶活性的多肽的方法，其包括：

(a)在有助于所述多肽产生的条件下培养权利要求10的转基因植物或植物细胞；和

(b)回收所述多肽。

12.一种产生亲本细胞的突变体的方法，所述方法包括失活编码权利要求1-5中任一项的多肽的多核苷酸，其导致突变体与亲本细胞相比产生较少的所述多肽。