[发明专利]蘑菇的菌体分选方法及试剂盒无效
申请号: | 201180063608.3 | 申请日: | 2011-08-30 |
公开(公告)号: | CN103298953A | 公开(公告)日: | 2013-09-11 |
发明(设计)人: | 仓桥敦;藤森文启;佐藤真之;西堀耕三 | 申请(专利权)人: | 株式会社雪国舞茸 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/09;G01N33/53;G01N33/569 |
代理公司: | 中原信达知识产权代理有限责任公司 11219 | 代理人: | 王海川;穆德骏 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 蘑菇 菌体 分选 方法 试剂盒 | ||
技术领域
本发明涉及在蘑菇的人工栽培中简便且准确地对表型不同的蘑菇菌体进行分选的方法及试剂盒。更具体而言,本发明涉及以基因的表达量和/或其表达模式作为指标对蘑菇的菌体进行分选的方法及试剂盒。
背景技术
以往,在蘑菇的栽培中,从种菌接种到子实体收获,为了得到质量优良的蘑菇,由栽培者进行观察蘑菇的外观变化等经验性的管理。例如,通过利用目视对菌落、子实体发生过程进行观察等来排除蘑菇生产中产生异常子实体的不良蘑菇菌体。作为一例,公开了在含有溴麝香草酚蓝的培养基中对金针菇菌体进行培养并以培养基的颜色为指标对金针菇菌体进行分选的方法,另外,公开了通过在含有溴麝香草酚蓝的培养基中对金针菇菌体进行培养、以培养基的颜色为指标从呈现特定颜色的培养基中采集金针菇的菌体并纯化而得到特性稳定的菌株的方法(专利文献1)。
但是,包括该技术在内的许多技术为目视检查,即使对栽培者而言也要求具备高度的观察能力。而且,目视检查依赖于外观,因此,无法发现与菌丝或菌落的表型良好的蘑菇菌体观察不到差异的不良蘑菇菌体。这种情况下,在菌落和发菌时不能觉察到异常时,会在子实体发生的阶段注意到异常,从而使合算性降低。
现有技术文献
专利文献
专利文献1:日本特开2000-287568号公报
发明内容
发明所要解决的问题
为了从子实体发生之前的阶段开始识别蘑菇的表型、例如子实体的表型,期望对仅凭目视难以判断的蘑菇的内生变化进行考察。
因此,本发明的目的在于提供在蘑菇栽培中不需要用于目视判断的高技术而简便且准确地分选、排除不良蘑菇菌体的方法。
用于解决问题的手段
本发明人为了解决上述问题进行了深入研究,结果发现,通过对由微阵列分析及定量实时PCR的结果得到的基因的表达量和/或其表达模式进行比较,能够识别优良蘑菇菌体与不良蘑菇菌体的品种内部差异,从而完成了本发明。
即,本发明为以下[1]~[12]项。
[1]一种蘑菇的菌体分选方法,其特征在于,以至少一种蘑菇基因的表达量和/或其表达模式作为指标来识别蘑菇的品种内部差异。
[2]如[1]所述的蘑菇的菌体分选方法,其特征在于,以至少一种蘑菇基因的表达量和/或其表达模式作为指标来识别蘑菇的品种内部差异并对蘑菇进行分选或纯化而得到菌株。
[3]如[1]或[2]所述的蘑菇的菌体分选方法,其特征在于,通过杂交、聚合酶链式反应(PCR)或测序来检测蘑菇基因的表达量和/或其表达模式。
[4]如[1]~[3]中任一项所述的蘑菇的菌体分选方法,其特征在于,蘑菇基因具有序列号1~312中任一个序列号所示的碱基序列,或者在严格的条件下与对序列号1~312中任一个序列号所示的碱基序列的全部或一部分具有互补序列的核酸杂交,或者具有对序列号1~312中任一个序列号所示的碱基序列具有80%以上的同源性的碱基序列。
[5]如[4]所述的蘑菇的菌体分选方法,其特征在于,蘑菇基因具有序列号13、100、138、160、212或292所示的碱基序列,或者在严格的条件下与对序列号13、100、138、160、212或292中任一个序列号所示的碱基序列的全部或一部分具有互补序列的核酸杂交,或者具有对序列号13、100、138、160、212或292中任一个序列号所示的碱基序列具有80%以上的同源性的碱基序列。
[6]如[1]或[2]所述的蘑菇的菌体分选方法,其特征在于,通过由该基因编码的蛋白质的表达量和/或其表达模式对蘑菇基因的表达量和/或其表达模式进行检测。
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