[发明专利]导致萜烯生物合成增强的1-脱氧-D-木酮糖5-磷酸合酶等位基因

权利要求书

1.一种增强植物或细菌的1-脱氧-D-木酮糖5-磷酸合酶(DXS)活性以增加萜烯产生的方法，其包括以下步骤：

a)通过将参考序列与植物、细菌或酵母中具有DXS活性之多肽的序列进行序列比对来确定所述植物、细菌或酵母的所述多肽上的至少一个(优选两个)突变位点，所述参考序列选自包含以下的组:SEQ ID N°2、SEQ ID N°4、SEQ ID N°6、SEQ ID N°19，SEQ ID N°20、SEQ ID N°21、SEQ ID N°22和SEQ ID N°23;

b)在至少一个突变位点(优选两个突变位点)上进行突变;

c)得到具有与典型DXS相比增强的DXS活性的多肽。

2.植物或细菌的多肽，其具有与所述植物或细菌的典型DXS相比增强的DXS活性，所述多肽可通过根据权利要求1所述的方法得到。

3.具有DXS活性的分离的多肽，其包含与序列SEQ ID N°21或其片段具有至少90%同一性的序列，其中SEQ ID N°21第213位上的氨基酸是天冬酰胺和/或SEQ ID N°21第234位上的氨基酸是半胱氨酸。

4.根据权利要求3所述的分离的多肽，其具有所述序列SEQ ID N°22或其片段，其中SEQ ID N°22第213位上的氨基酸是天冬酰胺和/或SEQ ID N°22第234位上的氨基酸是半胱氨酸。

5.根据权利要求3或4所述的多肽，其中所述多肽包含序列SEQ ID N°19。

6.根据权利要求3或4所述的多肽，其中所述多肽包含序列SEQ ID N°20。

7.具有DXS活性的分离的多肽，其包含与序列SEQ ID N°1或其片段具有至少90%同一性的序列，其中SEQ ID N°1第310位上的氨基酸是半胱氨酸和/或SEQ ID N°1第288位上的氨基酸是天冬酰胺。

8.根据权利要求7所述的多肽，其中所述多肽包含与序列SEQ ID N°2或其片段具有至少90%同一性的序列，并且其中SEQ ID N°2第306位上的氨基酸是半胱氨酸和/或SEQ ID N°2第284位上的氨基酸是天冬酰胺。

9.根据权利要求8所述的多肽，其中所述多肽包含序列SEQ ID N°4。

10.根据权利要求8所述的多肽，其中所述多肽包含序列SEQ ID N°6。

11.分离的多核苷酸，其包含编码根据权利要求2至10中任一项所述多肽的序列。

12.载体，其包含根据权利要求11所述的多核苷酸。

13.经转化的宿主细胞，其包含根据权利要求11所述的多核苷酸或根据权利要求12所述的载体。

14.根据权利要求13所述的经转化宿主细胞，其中所述经转化宿主细胞是选自包含真细菌、古细菌和蓝细菌细胞之组的原核细胞，优选地所述原核细胞是大肠杆菌(Escherichia coli)细胞。

15.根据权利要求13所述的经转化宿主细胞，其中所述经转化宿主细胞是选自包含动物、真菌、酵母和植物细胞之组的真核细胞，优选地是选自包含葡萄(Vits vinifera)、烟草(Nicotiana tabacu)和拟南芥(Arabidopsis thaliana)细胞之组的植物细胞。

16.转基因细菌，其包含根据权利要求11所述的多核苷酸或根据权利要求12所述的载体。

17.转基因植物，其包含根据权利要求11所述的多核苷酸、根据权利要求12所述的载体、或者根据权利要求13、14或15中任一项所述的宿主细胞。

18.一种制备如权利要求17所述的转基因植物的方法，其包括以下步骤:

a.用权利要求12所述的载体转化植物细胞;

b.选择表达如权利要求2至10和21中任一项所述之多肽的经转化植物细胞;以及

c.由所述经转化植物细胞产生转基因植物。