[发明专利]分泌的热休克蛋白-90α（Hsp90α）片段作为用于对抗一系列人类实体肿瘤的单克隆抗体药物的疫苗或表位或小分子药物的靶点

说明书

相关申请交叉引用

本申请要求2010年10月11递交的US61/391,776的优先权，其内容通过引用并入本文。

政府特许权

本发明是在美国国家卫生研究院授予的批准号RO1GM066193、RO1GM067100、GMAR67100-01、AR33625和RO1AR46538的政府资助下完成的。美国政府享有本发明的一定权利。

技术领域

本发明涉及利用Hsp90α或其片段的抑制剂治疗HIF-1α过表达（即结构性存在）肿瘤。

背景技术

本文引用的所有出版物通过引用方式全文并入，其并入程度如同每个单独的出版物或专利申请被专门且单独地通过引用方式并入一样。下面的描述包括对于理解本发明可能有用的信息。不承认本文中提供的任何信息是要求保护的本发明的现有技术或与之相关，也不承认任何明确或隐含引用的出版物是现有技术。

在常氧（约8%的组织氧含量）正常细胞中，组织氧平衡主转录因子的一个关键亚单位即缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）不断地合成，然后立即进行O₂依赖性脯氨酰羟化。该变性使HIF-1α蛋白靶向到泛素化蛋白酶体降解机制（23，29）。结果，HIF-1α的整体稳态水平保持在低水平，防止HIF-1α与HIF-1β二聚。然而，在缺氧条件下，HIF-1α的羟化反应和随后的降解受到抑制，导致细胞中的HIF-1α快速增加。增加的HIF-1α蛋白随后与稳态的HIF-1β（ARNT）二聚形成主转录复合蛋白HIF-1。HIF-1进而转位到细胞核中并以p300/CBP依赖方式调节包含缺氧反应元件（HRE）的基因的表达（1）。

与此相反，在许多实体肿瘤中发现的组织缺氧是由于快速增殖的肿瘤细胞在周围血管网上过度生长导致的，这种过度生长产生比从最近的血液循环的氧供应的范围更远的距离（3，29）。据推测，在持续缺血的情况下，肿瘤细胞进行基因改变以适应继续生存、扩张和发展的替代和自支持机制，直到在其周围构建起新生血管。HIF-1α的去调控表达是肿瘤细胞中明确表征的变化（23），其归因于HIF-1α泛素化和降解的癌基因活化、肿瘤抑制基因灭活或酶失活的作用（26）。在动物模型中，去调控的HIF-1α对于肿瘤发生具有关键作用。HIF-1α表达下调或去调控HIF-1α活动的抑制减缓了肿瘤生长并使肿瘤更容易通过放疗和化疗杀死（28）。在人体中，结构性表达的HIF-1α与大肿瘤体积、高品位的淋巴结阴性转移相关，这使得肿瘤不对放疗和化疗易感（18）。因此，肿瘤中的HIF-1α表达水平已经成为预测肿瘤转移患者的可能结果的标志。虽然破坏肿瘤细胞中的去调控HIF-1α在概念上可以防止肿瘤发展，但是直接靶向位于细胞内的HIF-1α或调控HIF-1α稳定性的酶被证明是具有挑战性的（26，28）。

人Hsp90伴侣蛋白族包括四个确认的成员，即由不同基因编码的胞质Hsp90α和Hsp90β、内质网GRP74和线粒体TRAP1（6）。与肿瘤细胞中的HIF-1α一样，Hsp90α也被发现在多种肿瘤中定量过表达或定性过度活化（18）。这些“额外”或“过度活化”的Hsp90α蛋白被认为结合和保护细胞内的癌基因产物的稳定性（17，25，41）。这种Hsp90α在肿瘤细胞中比其原癌基因蛋白对应物在周围正常细胞中看似更高程度的保护被用作开发抗癌药物的策略（42）。结合并抑制Hsp90的ATP结合和ATP水解功能的格尔德霉素（GM或苯醌安沙霉素（benzoquinone ansamycin））及其衍生物成为药物开发重点已超过十年（25）。GM本身即使在动物模型（36）也被证明毒性过大。一种GM的改性形式17-AAG（苯醌安沙霉素17-烯丙基氨基格尔德霉素）在临床前研究中表现出在毒性可耐受的剂量范围内的有前途疗效并已自1999年起进入了多个阶段1和阶段2/3的临床试验（33，37）。正在进行的临床试验正在开发几种新一代的化学改性减毒的GM相关药物。然而，主要障碍仍在于如何选择性地靶向肿瘤中的Hsp90癌基因保护活动以及保住Hsp90在正常细胞中的生理功能。