[发明专利]扩增核酸的检测方法和检测装置

权利要求书

1.核酸检测方法，其包括：

使双链DNA扩增片段的一个末端的单链区域与固定在固相上的第1寡核苷酸探针杂交的步骤，所述双链DNA扩增片段是在两个末端具有包含天然核苷酸的单链区域的双链DNA扩增片段。

2.根据权利要求1所述的核酸检测方法，其还包括：

使所述DNA扩增片段的另一个末端的单链区域与结合有标志物的第2寡核苷酸探针杂交的步骤。

3.根据权利要求2所述的核酸检测方法，其中，标志物包括着色担载体，并可以目测检测所述DNA扩增片段。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的核酸检测方法，其包括：

在核酸检测装置上检测所述DNA扩增片段的步骤。

5.根据权利要求1～4中任一项所述的核酸检测方法，其用色谱检测所述DNA扩增片段。

6.根据权利要求4或5所述的核酸检测方法，其包括下述步骤(a)-(c)：

(a)在所述核酸检测装置上的不同于固定有所述第1寡核苷酸探针的区域的区域中，配置所述DNA扩增片段的步骤，

(b)使用溶剂，使所述DNA扩增片段在朝向固定有所述第1寡核苷酸探针的区域的方向上在所述装置上扩散的步骤，以及

(c)在固定有所述第1寡核苷酸探针的区域中，使所述第1寡核苷酸探针与所述DNA扩增片段杂交的步骤。

7.根据权利要求6所述的核酸检测方法，其还包括：

在所述步骤(c)之前，使所述DNA扩增片段与结合有所述标志物的第2寡核苷酸探针杂交的步骤。

8.根据权利要求4或5所述的核酸检测方法，其中，

(d)在所述核酸检测装置上的不同于固定有所述第1寡核苷酸探针的区域的各个区域中，分别配置所述DNA扩增片段、以及结合有所述标志物的第2寡核苷酸探针，

(e)使用溶剂，使所述DNA扩增片段在朝向配置有第2寡核苷酸探针的区域的方向上扩散，所述第2寡核苷酸探针结合有所述标志物，

(f)在配置了结合有所述标志物的第2寡核苷酸探针的区域中，使所述DNA扩增片段与结合有标志物的第2寡核苷酸探针杂交，

(g)使在步骤(f)中杂交而得的复合物在朝向配置有所述第1寡核苷酸探针的方向上在展开介质上扩散，以及

(h)在固定有所述第1寡核苷酸探针的区域中，使所述第1寡核苷酸探针与所述复合物杂交。

9.根据权利要求1～8中任一项所述的核酸检测方法，其中，所述包含天然核苷酸的单链区域是与双链DNA区域相同方向的序列。

10.根据权利要求1～9中任一项所述的核酸检测方法，其中，所述DNA扩增片段是使用2种引物且通过核酸扩增方法获得的产物，所述引物具有在核酸扩增反应中不被双链化的标签区域。

11.根据权利要求1～9中任一项所述的核酸检测方法，其中，所述DNA扩增片段是使用第1引物组和第2引物组且通过核酸扩增方法获得的产物，

所述第1引物组包括下述引物，该引物具有能够与目标核酸的模板杂交的序列、和不能够与该模板杂交的共同序列，以及

所述第2引物组包括下述引物，该引物具有能够与所述共同序列的互补序列杂交的序列、和在核酸扩增反应中不被双链化的标签区域。

12.根据权利要求11所述的核酸检测方法，其中，所述在核酸扩增反应中不被双链化的标签区域包含天然核苷酸、且是与能够和共同序列的互补序列杂交的序列相同方向的序列。

13.检测装置，其为在权利要求1～12中任一项所述的核酸检测方法中使用的核酸检测装置，其具有：

配置所述DNA扩增片段的区域，

保持有所述第1寡核苷酸探针的色谱担载体，所述第1寡核苷酸探针待与所述DNA扩增片段结合，

结合有标志物的所述第2寡核苷酸探针。

14.双链DNA扩增片段，其为使用具有在核酸扩增反应中不被双链化的标签区域的2种引物且通过核酸扩增方法而获得的，在两个末端具有包含天然核苷酸的单链区域。

15.根据权利要求14所述的双链DNA扩增片段，其中，引物的在核酸扩增反应中不被双链化的标签区域包括天然核苷酸、且引物全长为相同方向的序列。