[发明专利]用于防治沼蛤属物种的药剂

权利要求书

1.一种用于在希望防治的场所防治沼蛤属(Limnoperna)物种的方法，所述方法包括向所述场所引入有效防治所述沼蛤属物种的量的至少下列之一：（a）包含细胞的细胞悬浮液，所述细胞具有假单胞菌属(Pseudomonas)物种的产毒特征；（b）一种或多种物质，所述物质（a）对沼蛤属物种具有毒性且（b）得自：假单胞菌属物种或得自假单胞菌属物种的细胞悬浮液。

2.权利要求1所述的方法，其中所述细胞悬浮液含有荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)或其突变株的细胞。

3.权利要求1所述的方法，其中所述细胞悬浮液含有死亡的细菌细胞。

4.权利要求1所述的方法，其中所述物质得自具有荧光假单胞菌ATCC55799的鉴别特征的假单胞菌属物种菌株。

5.权利要求1至6所述的方法，其中所述物质为蛋白质、肽、脂质或内酯。

6.权利要求1所述的方法，其中所述物质选自：

(a)如下所述的化合物，其（i）具有通过液相色谱/质谱（LC/MS）测定的约1280-1310的分子量，（ii）具有1H NMR值：9.25,8.36,8.06,7.82,7.71,7.52,7.45,6.82,6.36,6.08,5.42,5.39,5.30,5.14,4.68,4.42,4.31,4.16,4.11,4.07,3.95–3.86,3.83,3.72,3.66,3.53,3.48,3.37,3.17,3.06,2.56,2.53,2.45,2.32,2.21,2.02,1.96,1.84,1.72,1.65,1.61,1.51,1.48–1.37,1.32,1.12,0.94,0.91,0.68，和（c）使用水:乙腈梯度溶剂系统(0-10分钟；30-40%CH₃CN水溶液，10-20分钟；40-60%CH₃CN水溶液，20-60分钟；60-80%CH₃CN水溶液，60-65分钟；80-100%CH₃CN水溶液)，在2.5毫升/分钟的流速下，以210nm的紫外线检测，在反相C-18HPLC柱中，其高压液相色谱（HPLC）保留时间为约50-55分钟；

(b)如下所述的化合物，其（i）具有通过LC/MS测定的约1310-1335的分子量；（ii）使用水:乙腈梯度溶剂系统(0-10分钟；30-40%CH₃CN水溶液，10-20分钟；40-60%CH₃CN水溶液，20-60分钟；60-80%CH₃CN水溶液，60-65分钟；80-100%CH₃CN水溶液)，在2.5毫升/分钟的流速下，以210nm的紫外线检测，在反相C-18HPLC柱中，其HPLC的保留时间为约55-60分钟；

(c)如下所述的化合物，其（i）具有通过LC/MS测定的约540-550的分子量；（ii）使用水:乙腈的溶剂系统(0-10分钟；35-45%CH₃CN水溶液，10-20分钟；45-60%CH₃CN水溶液，20-50分钟；60-85%CH₃CN水溶液，50-60分钟；85-100%CH₃CN水溶液，60-70分钟；100%CH₃CN)，在10毫升/分钟的流速下，以210nm的紫外线检测，在反相C-18HPLC柱中，其HPLC的保留时间为约50-55分钟；

(d)如下所述的组合物，其包含可通过HPLC得自假单胞菌属物种细胞悬浮液的流分：使用水:乙腈溶剂系统(0-10分钟；35-45%CH₃CN水溶液，10-20分钟；45-60%CH₃CN水溶液，20-50分钟；60-85%CH₃CN水溶液，50-60分钟；85-100%CH₃CN水溶液，60-70分钟；100%CH₃CN)，在10毫升/分钟的流速下，以210nm的紫外线检测，保留时间为约45-50分钟，所述流分含有至少两种化合物，所述两种化合物(i)对腹足纲(Gastropoda)或双壳纲(Bivalvia)成员具有毒性，(ii)具有通过LC/MS测定的约630-660和约970-1000的分子量；

(e)如下所述的化合物，其为内酯并具有羟基化不饱和脂肪酸内酯结构，所述结构含有至少1个为5元γ-内酯的内酯基团、至少1个不饱和基团和至少1个醇基；核心结构的分子量为285-约310；含有至少15个碳和至少3个氧；

(f)具有以下结构的化合物：

其中：X各自独立地为--O、--NR₁或--S，其中：R₁是--H或C₁-C₆烷基；n=0-15，R₂-R₄各自独立地为--H、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基、取代的杂环基、环烷基、取代的环烷基、烷氧基、取代的烷氧基、硫烷基、取代的硫烷基、羟基、卤素、氨基、酰氨基、羧基、--C(O)H、酰基、氧酰基、氨基甲酸酯、磺酰基、氨磺酰、或硫酰基；m=双键或三键；

(g)如下所述的化合物，其具有羟基化不饱和脂肪酸结构，所述结构含有至少1个羧酸基团、至少1个不饱和基团和至少1个醇基；核心结构的分子量为约285-约310；含有至少15个碳和至少3个氧；

(h)具有以下结构的化合物：

其中：X各自独立地为--OH、--NR₁或--S，其中：R₁是--H或C₁-C₆烷基；n=0-15，R₂-R₄各自独立地为--H、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基、取代的杂环基、环烷基、取代的环烷基、烷氧基、取代的烷氧基、硫烷基、取代的硫烷基、羟基、卤素、氨基、酰氨基、羧基、--C(O)H、酰基、氧酰基、氨基甲酸酯、磺酰基、氨磺酰、或硫酰基；m=双键、三键；

(i)如下所述的化合物，其（i）可得自假单胞菌属物种；（ii）对沼蛤属物种具有毒性；（iii）具有通过液相色谱/质谱（LC/MS）测定的约240-265的分子量；（iv）具有¹H NMR值：δ5.35,2.28,2.04,1.61,1.34,1.31,0.91，并具有¹³C NMR值：δ176.63,129.75,129.64,33.86,31.81,29.73,29.68,29.20,29.13,29.08,28.94,27.05,27.00,24.98,22.62,13.35；（v）使用水:乙腈（CH₃CN）梯度溶剂系统（0-20分钟；90-0%CH₃CN水溶液，20-24分钟；100%CH₃CN，24-27分钟；0-90%CH₃CN水溶液，27-30分钟；90%CH₃CN水溶液），在0.5毫升/分钟的流速下，以210nm的紫外线检测，在反相C-18HPLC柱(Phenomenex,Luna5μC18(2)100A,100x4.60mm)中，其高压液相色谱（HPLC）保留时间为约16-25分钟；

(j)具有如下结构的化合物：

或其可接受的盐或立体异构体，其中：X各自独立地为--OH、--NR₁或--S，其中：R₁是--H或C₁-C₆烷基；n=0-15，R₂、R₃各自独立地为--H、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基、取代的杂环基、环烷基、取代的环烷基、烷氧基、取代的烷氧基、硫烷基、取代的硫烷基、羟基、卤素、氨基、酰氨基、羧基、--C(O)H、酰基、氧酰基、氨基甲酸酯、磺酰基、氨磺酰、或硫酰基；m=双键、三键；

(k)具有如下结构的化合物：

或其可接受的盐或立体异构体，其中：X各自独立地为--OH,--NR₁或--S，其中：R₁是--H或C₁-C₆烷基；n=0-15，R₂、R₃各自独立地为--H、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基、取代的杂环基、环烷基、取代的环烷基、烷氧基、取代的烷氧基、硫烷基、取代的硫烷基、羟基、卤素、氨基、酰氨基、羧基、--C(O)H、酰基、氧酰基、氨基甲酸酯、磺酰基、氨磺酰、或硫酰基；m=0-15；

(l)如下所述的化合物，其（i）可得自假单胞菌属物种；（ii）对沼蛤属物种具有毒性；（iii）具有通过液相色谱/质谱（LC/MS）测定的约280-320、更特别地为298的分子量；（iv）具有¹H NMR值：δ5.57,5.42,3.65,2.36,2.23,2.06,1.65,1.49,1.33,0.90，并具有¹³C NMR值：δ179.41,133.23,125.13,71.51,36.73,35.26,33.98,31.81,29.48,29.32,29.02,28.99,28.91,27.32,25.67,24.64,22.62,14.08；（v）使用水:乙腈（CH₃CN）梯度溶剂系统（0-20分钟；90-0%CH₃CN水溶液，20-24分钟；100%CH₃CN，24-27分钟；0-90%CH3CN水溶液，27-30分钟；90%CH₃CN水溶液），在0.5毫升/分钟的流速下，以210nm的紫外线检测，在反相C-18HPLC柱(Phenomenex,Luna5μC18(2)100A,100x4.60mm)中，其高压液相色谱（HPLC）保留时间为约13-20分钟，更特别地为约16分钟，甚至更特别地为约16.81分钟；

(m)具有如下结构的化合物：

或其可接受的盐或立体异构体，其中：X各自独立地为--OH、--NR₁或--S，其中：R₁是--H或C₁-C₆烷基；n=0-15，R₂-R₄各自独立地为--H、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基、取代的杂环基、环烷基、取代的环烷基、烷氧基、取代的烷氧基、硫烷基、取代的硫烷基、羟基、卤素、氨基、酰氨基、羧基、--C(O)H、酰基、氧酰基、氨基甲酸酯、磺酰基、氨磺酰、或硫酰基；m=双键、三键；

(n)具有如下结构的化合物：

其中：R₁是--H或C₁-C₆烷基；n=0-15，R₂-R₄各自独立地为--H、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基、取代的杂环基、环烷基、取代的环烷基、烷氧基、取代的烷氧基、硫烷基、取代的硫烷基、羟基、卤素、氨基、酰氨基、羧基、--C(O)H、酰基、氧酰基、氨基甲酸酯、磺酰基、氨磺酰、或硫酰基；m=0-15；

(o)内酯，其选自γ-十二内酯、δ-十三内酯、piliferolide A和α-庚基-γ-丁内酯；和

(p)假蒟亭碱类似物，其选自N-环戊基癸酰胺、N-(癸酰基)吡咯烷、N-(癸酰基)哌啶、N-(癸酰基)六亚甲基亚胺、N-环戊基癸烯酰胺、(N-(癸烯酰基)吡咯烷、N-(癸烯酰基)哌啶、N-(癸烯酰基)六亚甲基亚胺和N-(癸烯酰基)哌啶；

(q)11-羟基-12-烯硬脂酸；

(r)9-十六碳烯酸；以及

(s)蓖麻油酸。