[发明专利]单一单元离子交换色谱抗体纯化

权利要求书

1.从生物反应器中生产的细胞培养液中纯化抗体的方法，所述方法至少包含中间纯化步骤和精提纯步骤，其中所述新的纯化步骤包含组合的串联、联机的AEX和CEX色谱。

2.如权利要求1所述的方法，其中先进行所述阴离子交换(AEX)色谱步骤，作为流出级分得到分离混合物，然后进行串联、联机阳离子交换(CEX)色谱步骤，作为流出级分得到经纯化的抗体制剂，并且其中所述经纯化的抗体制剂经过至少一个进一步纯化步骤。

3.如权利要求1所述的方法，其中先进行所述阳离子交换(CEX)色谱步骤，作为流出级分得到分离混合物，然后进行串联、联机阴离子交换(AEX)色谱步骤，作为流出级分得到经纯化的抗体制剂，并且其中所述经纯化的抗体制剂经过至少一个进一步纯化步骤。

4.如权利要求1至3中任意一项所述的方法，其中串联联机的AEX和CEX色谱步骤作为单一单元操作进行。

5.如权利要求1至4中任意一项所述的方法，其中所述分离混合物在第二离子交换步骤之前补充适量的溶液，以便调节pH和电导率，以获得所述第二离子交换色谱步骤的最佳性能。

6.如权利要求2所述的方法，其中所述分离混合物在CEX色谱之前补充适量的酸性溶液。

7.如权利要求6所述的方法，其中所述分离混合物在CEX色谱之前补充适量的溶液，所述溶液包含柠檬酸(或其一元或二元钠盐或钾盐)、磷酸(或其一元或二元钠盐或钾盐)、乙酸、盐酸或硫酸。

8.如权利要求3所述的方法，其中所述分离混合物在AEX色谱之前补充适量的碱性溶液。

9.如权利要求8所述的方法，其中所述分离混合物在AEX色谱之前补充适量的溶液，所述溶液包含氢氧化钠或氢氧化钾(或其一元或二元钠盐或钾盐)或三(羟甲基)氨基甲烷。

10.能够用于根据权利要求2所述的方法的单一操作单元，其包含阴离子交换色谱部分和阳离子交换色谱部分，所述阴离子交换色谱部分和阳离子交换色谱部分串联连接，其中所述阴离子交换色谱部分的出口与所述阳离子交换色谱部分的入口相连，其中所述单元包括在所述阴离子交换色谱部分的上游端的入口和在所述阳离子交换色谱部分的下游端的出口，并且其中所述单元还包括位于所述阴离子交换色谱部分和所述阳离子交换色谱部分之间的入口。

11.能够用于根据权利要求3所述的方法的单一操作单元，其包含阳离子交换色谱部分和阴离子交换色谱部分，所述阳离子交换色谱部分和阴离子交换色谱部分串联连接，其中所述阳离子交换色谱部分的出口与所述阴离子交换色谱部分的入口相连，其中所述单元包括在所述阳离子交换色谱部分的上游端的入口和在所述阴离子交换色谱部分的下游端的出口，并且其中所述单元还包括位于所述阳离子交换色谱部分和所述阴离子交换色谱部分之间的入口。