[发明专利]治疗前列腺癌的免疫治疗方法

说明书

发明领域

本发明涉及前列腺癌及其转移的治疗领域。更具体地，本发明涉及免疫原性多肽和编码这种多肽的核酸，所述免疫原性多肽包括前列腺肿瘤细胞相关(糖)蛋白或其免疫学活性变体的至少一部分。这种多肽和核酸序列可用于前列腺癌及其转移的治疗性和预防性治疗的疫苗和药物组合物。

发明背景

前列腺癌是男性中排在第四位最普遍的癌症。在北美和北欧，它是男性中最常见的癌症，并且在男性中是癌症死亡的第二主要原因。仅仅在美国，每年超过40,000人死于该疾病，仅次于肺癌。尽管这些数字巨大，但仍然没有转移性前列腺癌的有效疗法。大量临床证据显示，人前列腺癌具有向骨转移的倾向，该疾病显示不可避免的从雄激素依赖性向雄激素难治性状况发展，导致增加的患者死亡率。

尽管对该疾病的疗法进行了相当的研究，前列腺癌仍然是难治疗的。手术前列腺切除术，放射治疗，激素去除疗法，手术阉割和化疗仍然是主要的治疗方式。不幸的是，这些方法在很大比例的病例中没有效果。人的年龄和基本健康状况，转移程度，显微镜下外观，和对初步治疗的癌症应答在确定疾病和潜在治疗的结果中是重要的。是否带有治愈目的来治疗局部前列腺癌(包含在前列腺内的肿瘤)的决定是根据患者存活和生活质量在预期有益和不良影响之间的患者权衡。

新治疗靶标的鉴定对于改进前列腺癌患者的现有治疗非常重要。分子医学的最新发展增加了对肿瘤特异性细胞表面抗原(可用作不同免疫治疗或小分子策略的靶标)的兴趣。

在免疫系统的多种组成中，T淋巴细胞可能是最擅长识别并去除表达外源或肿瘤相关抗原的细胞。细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表达CD8细胞表面标记，专用于诱导靶细胞裂解，它们通过穿孔素/粒酶和/或Fas/Fas-L途径与所述靶细胞反应。针对CTL抗原的T细胞受体(TCR)结合靶细胞表面的分子复合物(由来源于加工的外源或肿瘤相关抗原的小肽(8-11)残基形成)，其与主要组织相容性复合物(MHC)I型分子相关。

其他主要T细胞亚型，辅助T淋巴细胞(HTL或T辅助细胞)，特征在于表达CD4表面标记。T辅助细胞识别稍微更大的肽(11-20个残基)，其也来源于外源或肿瘤相关抗原，但是在MHC II型分子背景中，其只由专门化抗原呈递细胞(APC)如B淋巴细胞、巨噬细胞和树突状细胞(DC)表达。

作为通过APC上的肽/MHC复合物对初始CTL和HTL的TCR刺激的结果，CTL成熟为效应杀伤细胞，其能够裂解表达相应肽/MHC I型复合物的(肿瘤)细胞。活化的HTL增强CTL应答，通过使APC更有效的刺激初始CTL以及通过产生刺激CTL成熟和增殖的淋巴因子进行。T辅助细胞的增强作用在次级淋巴器官(在此免疫应答开始)和肿瘤部位(在此CTL应答需要维持直至肿瘤细胞被清除)均发生。因此，预测疫苗将会刺激肿瘤活性CTL和HTL产生有效的抗肿瘤免疫。

适于免疫治疗癌症策略的抗原应当在癌症组织中高表达，并且理想的不在正常成人组织中表达。但是，在对生命来说不是必需的组织中的表达也是可以接受的。

发明概述

本发明人出人意料的发现，透明带(zona pellucid)(糖)蛋白提供了用于治疗前列腺癌及其转移的免疫治疗策略的合适抗原。根据本发明，能够诱导CD8⁺和/或CD4⁺T细胞应答的ZP抗原以及编码所述抗原的核酸序列适用于前列腺癌的治疗性和/或预防性治疗的免疫治疗策略。

本发明基于以下发现，前列腺肿瘤细胞显示显著的ZP(糖)蛋白的表达，其程度为使得这些细胞被通过施用ZP(糖)蛋白来源的抗原引发的免疫应答有效靶向，导致原发前列腺肿瘤以及由其来源的转移的生长减缓或甚至大小减小。本策略同样适用于在受治疗的对象中预防前列腺肿瘤转移以及预防前列腺肿瘤复发。

ZP3通常发现于所谓的“透明带”，其形成环绕发育中和排卵的卵母细胞和植入前胚胎的细胞外基质。这种透明带诱导精子的顶体反应，决定受精的种属特异性，并预防哺乳动物的多精受精。透明带包含4种主要糖蛋白，ZP1，ZP2，ZP3和ZP4

之前从来没有证明ZP(糖)蛋白在前列腺(来源)的肿瘤细胞中的表达。因此现有技术中没有以下启示：前列腺肿瘤细胞实际上可以变成通过施用ZP(来源的)抗原引发的细胞免疫应答的靶。

因此本发明第一次提供了治疗人前列腺肿瘤的方法，包括用包括I型MHC-或II型MHC-限制性天然透明带T细胞表位的多肽或其免疫学活性变体的多肽源免疫所述人，以及提供了适用于这种方法的组合物。

本发明将在下文更详细地描述。