[发明专利]用于检测针对靶抗体的中和抗体的双功能体外靶结合测定

说明书

本申请包含于2010年8月10日经由EFS-WEB递交的ASCII“txt”适用序列表，其作为37C.F.R.第1.821章(c)和1.821章(e)所要求的计算机可读形式(CRF)和纸质拷贝，并且其全文在此通过引用的方式并入。于2010年8月10日创建的“txt”文件的名称是：A-1586-US-PSP-SeqList081010_ST25.txt，大小为25kb。

本申请通篇的各种出版物引用在圆括号或方括号中。这些出版物的公开内容的全文在此以引用的方式并入本申请以便更充分地描述本申请所属领域的现有技术。

发明背景

发明领域

本发明涉及治疗性抗体领域。

相关技术讨论

抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)是体液免疫应答的机制之一。在ADCC应答中，免疫系统的效应细胞，通常为自然杀伤(NK)细胞，主动裂解已由结合至靶细胞表面上的靶蛋白的特异性抗体结合的靶细胞。中性粒细胞和嗜酸性粒细胞也可以介导ADCC。例如，嗜酸性粒细胞可通过ADCC杀死称为蠕虫肠虫(helminth)的某些寄生蠕虫。

已报道各种IgG同种型的抗体具有某种ADCC活性，但是通常，IgG1和IgG3同种型的特征为具有显著的抗体依赖性细胞毒性(ADCC)活性。在一项研究中，报道IgG1和IgG3抗体对于介导单核细胞或活性U937细胞ADCC同样有效；在NK细胞介导的ADCC中IgG1比IgG3更具活性。(Rozsnyay等，Distinctive role of IgG1and IgG3isotypes in Fc gamma R-mediated functions，Immunology66(4)：491-498(1989))。据报道，IgG3敏感性红细胞抑制IgG1诱导的裂解，这意味着每种子类参与相同的FcγR受体，但是裂解需要IgG3分子不能递送的另外“信号”。(Rozsnyay等，ibid.)。FcγRIIIa(CD16a)已被鉴定为ADCC效应子功能的相关受体。

研究已揭示从人IgG1抗体的低聚糖去除岩藻糖导致经由与FcγRIIIa结合的IgG1增加使抗体依赖性细胞毒性(ADCC)显著增强，并且可经由NK细胞的有效募集和活化降低ADCC诱导所需的抗原密度。(Niwa等，Enhanced Natural Killer Cell Binding and Activation by Low-Fucose IgG1Antibody Results in Potent Antibody-Dependent Cellular Cytotoxicity Induction at Lower Antigen Density，Clinical Cancer Research11：2327(2005)；Satoh等，Non-fucosylated therapeutic antibodies as next-generation therapeutic antibodies，Expert Opinion on Biological Therapy6(11)：1161-1173(2006))。这种现象可尤其用于治疗性抗体。治疗性单克隆抗体如利妥昔单抗和曲妥珠单抗广泛用于治疗肿瘤和/或自身免疫疾病。(Stavenhagen等，Fc Optimization of Therapeutic Antibodies Enhances Their Ability to Kill Tumor Cells In vitro and Controls Tumor Expansion In vivo via Low-Affinity Activating FcγReceptors，Cancer Research67(18)：8882-90(2007)；Clynes，RA等，Inhibitory Fc receptors modulate in vivo cytoxicity against tumor targets，Nat Med6(4)：443-46(2000)；Hauser等，B-cell depletion with rituximab in relapsing-remitting multiple sclerosis，NEJM358：676-88(2008))。