[发明专利]源自巴西橡胶树的乳胶分泌组织特异性SRPP启动子及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及源自巴西橡胶树乳胶分泌组织特异性SRPP启动子及其用途。更详细地，涉及源自巴西橡胶树（Hevea brasiliensis）的小橡胶粒子蛋白（SRPP，small rubber particle-associated protein）启动子，其由SEQ ID No.1的碱基序列构成；包含上述启动子的重组植物表达载体；转化上述重组植物表达载体的植物体及其种子；使外源基因在转化植物体内乳胶分泌组织特异性表达的方法，该方法包括在上述重组植物表达载体上重组外源基因的步骤；以及由上述方法制备的外源基因在乳胶分泌组织特异性表达的转化植物体及其种子。

背景技术

通常被称为橡胶树（rubber tree）的巴西橡胶树（Hevea brasiliensis）属于大戟科（family Euphorbiaceae），是在橡胶树属中经济层面上最为重要的一种树。巴西橡胶树可大量生产作为天然橡胶主要原料的乳胶（latex），几乎是目前工业上唯一已知的天然橡胶资源。90%以上的天然橡胶由马来西亚、印度尼西亚、泰国及缅甸等东南亚地区生产，而韩国每年使用的20万吨以上的天然橡胶全部都是依靠进口获得。

橡胶树中橡胶的生物合成在橡胶树产乳菌丝（lactifer）细胞质的乳胶中浮游的橡胶粒子（rubber particle）表面产生。已知上述橡胶粒子结合有几个橡胶粒子结合蛋白质（RPP，rubber particle-associated protein），其中SRPP是与直径在10μm以下的小橡胶粒子结合的蛋白质。但是关于SRPP是否只在乳胶组织中表达这一问题，还处于还没有经过组织解剖学方法进行精密验证的状态。

蛋白质的合成始于DNA编码的遗传信息传递到mRNA的转录（transcription）过程。上述转录通过位于基因上游（upstream）的启动子与RNA聚合酶（polymerase）的结合而开始。所有的启动子在离转录起始点一定距离的位置上具有共有碱基序列（consensus sequence），已知其对于RNA聚合酶的启动子的识别和结合来说非常重要。这些启动子是决定重组蛋白质产生效率的重要因素之一。

现有的源自花椰菜花叶病毒的CaMV35S启动子是在双子叶植物的所有组织中表达效率极佳的启动子。因此，是在植物体中表达基因方面最能够有效使用的启动子。但是，上述启动子不适合使特定基因转化而仅在所需要的组织表达时使用。因此非常需要研究开发出一种组织特异性表达启动子，其能够减少需要的组织外的其它组织中的不必要的表达。

本发明人制备了对于SRPP重组蛋白质的抗体，并实施免疫染色分析法，其目的在于，确认源自巴西橡胶树的SRPP基因是否在乳胶分泌组织中特异性表达。

韩国授权专利第10-0789274号公开有一种源自谷氨酸棒状杆菌的新型启动子，韩国授权专利第10-0781059号公开有一种转化植物体的制备方法，该方法利用源自拟南芥的环境应激诱导性启动子，使靶蛋白质在保卫细胞中进行特异性表达。

发明内容

本发明要解决的技术问题

本发明是为了实现上述目的而完成的。本发明人通过组织解剖学方法确认了源自巴西橡胶树的SRPP、蛋白质仅在乳胶分泌组织中特异性表达，对SRPP启动子碱基序列进行研究后，制备了在SRPP启动子上结合标记（Marker）基因（GUS）的转化载体（pBI101-SRPPpro::GUS），将其转化到具有乳胶分泌组织、且容易转化的模型植物体-俄罗斯蒲公英上，确认了依靠SRPP启动子的GUS表达是否在乳胶分泌组织中特异性的被诱导，从而完成了本发明。

技术方案

为了解决上述课题，本发明提供源自巴西橡胶树的SRPP启动子，其由SEQ ID No.1的碱基序列构成。

此外，本发明提供包含上述启动子的重组植物表达载体。

此外，本发明提供转化上述重组植物表达载体的植物体及其种子。

此外，本发明提供使外源基因在转化植物体内乳胶分泌组织特异性表达的方法，该方法包括在上述重组植物表达载体上重组外源基因的步骤。

此外，本发明提供由上述方法制备的外源基因在乳胶分泌组织特异性表达的转化植物体及其种子。

有益效果

利用本发明的源自巴西橡胶树的SRPP启动子，可获得使外源基因在乳胶分泌组织中特异性表达的转化植物体，因此有望在植物体内调节天然橡胶生物合成过程和生产率的增减。

附图说明