[发明专利]经修饰以增加植物转化频率的土壤杆菌属的菌株

权利要求书

1.一种用于转化植物的方法，其包括使所述植物的细胞与具有至少一个pTi辅助质粒和pTi质粒的土壤杆菌属(Agrobacterium)菌株接触，所述pTi辅助质粒包含pSB1的14.8KpnI片段，所述pTi质粒具有至少一个卸甲T-DNA区，所述T-DNA区包含至少一个右T-DNA边界和邻近于所述边界的外源DNA，其中所述质粒具有相对于彼此的不同复制起点。

2.权利要求1的方法，其中土壤杆菌属菌株中从pSB分离的14.8KpnIVirBCDG片段在RecA功能中具有缺陷。

3.一种用于转化植物的方法，其包括使所述植物的细胞与土壤杆菌属的细菌接触，所述细菌具有pSB1的14.8KpnI VirBCDG片段和具有至少一个卸甲T-DNA区的pTi质粒，其中已经将所述14.8KpnI VirBCDG片段整合到所述细菌的染色体的中性整合位点中。

4.依照权利要求1-2中任一项的用于转化植物的方法，其中所述细菌进一步包含具有邻近于至少一个土壤杆菌属T-DNA边界的T-DNA区的质粒，所述质粒具有IncP不相容组的复制起点。

5.依照权利要求3的用于转化植物的方法，其中所述细菌进一步包含具有邻近于至少一个土壤杆菌属T-DNA边界的T-DNA区的质粒。

6.依照权利要求3的用于转化植物的方法，其中所述土壤杆菌属菌株在RecA功能性中有缺陷。

7.依照权利要求4-6中任一项的用于转化植物的方法，其中所述T-DNA区含有3种或更多种基因序列。

8.依照权利要求4-7中任一项的用于转化植物的方法，其中所述T-DNA区含有等于或大于25,000个核苷酸碱基对。

9.依照权利要求4-8中任一项的用于转化植物的方法，其中在转化所述植物时所述T-DNA区被插入到所述植物细胞中的单个位置中。

10.依照权利要求4-9中任一项的用于转化植物的方法，其中所述T-DNA区包含多于一种基因序列，并且所述基因序列具有等于或大于60%的序列同源性。

11.依照权利要求4-10中任一项的用于转化植物的方法，其中所述T-DNA区编码一种或多种杀虫蛋白、除草蛋白、或杀虫蛋白和除草剂耐受蛋白的混合物。

12.依照权利要求4-11中任一项的用于转化植物的方法，其中所述T-DNA区编码Cry1Ca杀虫蛋白、Cry1F杀虫蛋白、和Cry1Ab1杀虫蛋白。

13.依照权利要求4-12中任一项的用于转化植物的方法，其中所述T-DNA区编码Cry1Ca杀虫蛋白、Cry1F杀虫蛋白、Cry1Ab1杀虫蛋白、和AAD-1除草剂耐受蛋白。

14.依照权利要求1-13中任一项的方法，其中所述植物是单子叶植物。

15.依照权利要求1-14中任一项的方法，其中将14.8KpnI VirBCDG片段克隆到pDAB9291质粒的Kpn I位点中。

16.依照权利要求1-15中任一项的方法，其中所述pTi辅助质粒是质粒pMP90。

17.依照权利要求1-16中任一项的方法，其中所述pTi辅助质粒是质粒pTiC58Δ。

18.依照权利要求15的方法，其进一步包括使用质粒pDAB9292DNA来转化所述土壤杆菌属菌株。

19.依照权利要求1-18中任一项的方法，其进一步包括在使培养的组织经过转化后选择转化的细胞或转化的组织的步骤。

20.一种土壤杆菌属菌株，其具有至少一个pTi辅助质粒和pTi质粒，所述pTi辅助质粒包含pSB1的14.8KpnI片段，所述pTi质粒具有至少一个卸甲T-DNA区，其中所述质粒具有相对于彼此的不同的复制起点。

21.权利要求20的土壤杆菌属菌株，其中所述土壤杆菌属菌株在RecA功能中有缺陷。

22.具有转化增强特性的土壤杆菌属菌株，其包含从pSB1分离的14.8KpnI VirBCDG片段和具有至少一个卸甲T-DNA区的pTi质粒。