[发明专利]对于谷氨酸显示高活性的新型氨基转移酶、编码该酶的基因和它们的利用法有效
| 申请号: | 201180046832.1 | 申请日: | 2011-09-28 |
| 公开(公告)号: | CN103534350A | 公开(公告)日: | 2014-01-22 |
| 发明(设计)人: | 伊藤纪幸;西聪子;川野茂;八十原良彦 | 申请(专利权)人: | 株式会社钟化 |
| 主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12N9/10;C12P41/00 |
| 代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 张平元;张永新 |
| 地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 对于 谷氨酸 显示 活性 新型 氨基转移酶 编码 基因 它们 利用 | ||
1.一种多肽,其具有下述的理化学性质(1),
(1)作用:催化如下氨基转移反应,该反应为在氨基供体的存在下与1-苄基-3-吡咯烷酮作用,生成光学纯度93%e.e.以上的(S)-1-苄基-3-氨基吡咯烷。
2.根据权利要求1所述的多肽,其还具有下述的理化学性质(2):
(2)底物特异性:
(a)氨基供体:显示对(S)-1-苯乙胺的活性,相比于L-丙氨酸对L-谷氨酸显示更高的活性,且对于β-丙氨酸、4-氨基丁酸实质上不显示活性;
(b)氨基受体:相比于丙酮酸对2-氧代戊二酸显示更高的活性。
3.根据权利要求1或2所述的多肽,其还具有以下的理化学性质(3)至(6):
(3)最适pH:7.0~8.0;
(4)最适温度:30~50℃;
(5)热稳定性:在30~50℃处理30分钟时,保持处理前的70%以上的残留活性;
(6)分子量:在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法中,约48kDa。
4.根据权利要求1~3中任一项所述的多肽,其中:
所述多肽为从属于节杆菌属(Arthrobacter属)的微生物获得的多肽。
5.根据权利要求1~3中任一项所述的多肽,其中:
所述多肽为从节杆菌属菌种(Arthrobacter sp.)获得的多肽。
6.根据权利要求1~3中任一项所述的多肽,其中:
所述多肽为从节杆菌属菌种(Arthrobacter sp.)KNK04-25(NITE BP-954)获得的多肽。
7.一种多肽,其为以下(a)至(g)中任一项所述的多肽:
(a)包括序列表的序列编号1所示的氨基酸序列的多肽;
(b)包括在序列表的序列编号1所示的氨基酸序列中缺失、取代、插入或添加了1个或多个氨基酸的氨基酸序列、且具有在氨基供体的存在下与1-苄基-3-吡咯烷酮作用生成光学纯度93%e.e.以上的(S)-1-苄基-3-氨基吡咯烷的活性的多肽;
(c)包括在序列表的序列编号1所示的氨基酸序列中缺失、取代、插入或添加了1个或多个氨基酸的氨基酸序列、且作为氨基供体显示对(S)-1-苯乙胺的活性,相比于L-丙氨酸对L-谷氨酸显示更高的活性,且对于β-丙氨酸、4-氨基丁酸实质上不显示活性,作为氨基受体相比于丙酮酸对2-氧代戊二酸具有更高的活性的多肽;
(d)包括在序列表的序列编号1所示的氨基酸序列中缺失、取代、插入或添加了1个或多个氨基酸的氨基酸序列、且最适pH为7.0~8.0,最适温度为30~50℃,在30~50℃处理30分钟时保持处理前的70%以上的残留活性,分子量在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法中约为48kDa的多肽;
(e)包括与序列表的序列编号1中记载的氨基酸序列具有50%以上的序列同一性的氨基酸序列、且具有在氨基供体的存在下与1-苄基-3-吡咯烷酮作用生成光学纯度93%e.e.以上的(S)-1-苄基-3-氨基吡咯烷的活性的多肽;
(f)包括与序列表的序列编号1中记载的氨基酸序列具有50%以上的序列同一性的氨基酸序列、且作为氨基供体显示对(S)-1-苯乙胺的活性,相比于L-丙氨酸对L-谷氨酸显示更高的活性,且对于β-丙氨酸、4-氨基丁酸实质上不显示活性,作为氨基受体相比于丙酮酸对2-氧代戊二酸具有更高的活性的多肽;
(g)包括与序列表的序列编号1中记载的氨基酸序列具有50%以上的序列同一性的氨基酸序列、且最适pH为7.0~8.0,最适温度为30~50℃,在30~50℃处理30分钟时保持处理前的70%以上的残留活性,分子量在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法中约为48kDa的多肽。
8.包括编码权利要求1~7中任一项所述的多肽的碱基序列的DNA。
9.根据权利要求8所述的DNA,其是下述(A)至(C)中任一项所述的DNA:
(A)包括序列表的序列编号2中记载的碱基序列的DNA;
(B)在严谨的条件下,和包括与序列表的序列编号2中记载的碱基序列互补的碱基序列的DNA杂交的DNA;
(C)包括在序列表的序列编号2中记载的碱基序列中,缺失、取代、插入或添加了1个或多个碱基的碱基序列的DNA。
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